目的观察甲状旁腺激素(PTH)基因和蛋白体外表达情况,并评价其基因治疗甲状旁腺功能低下模型鼠的作用.方法(1)以脂质体将质粒pcDPG分别1次和多次转染293细胞,观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达并计算转染率;(2)转染24、48、72和96 h后real-time定量PCR和Western blot法检测PTH基因与蛋白表达,并活性鉴定;(3)建立甲状旁腺功能低下症模型,将pcDPG质粒多次肌肉注射治疗,监测血钙和PTH值、存活时间及各器官病理变化.结果转染后24 h即见GFP表达,72 h达高峰,96 h开始减少;多次转染后GFP表达率可达90
作者:温济民;钟宇华;孙芸;于春梅;吴全理
来源:中华实验外科杂志 2006 年 23卷 1期