目的 研究将缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因转染人间充质干细胞(hMSCs)的体内促血管生成作用,为促进组织工程骨血管化提供新的方法和策略.方法 构建pIRES3/HIF-1α逆转录病毒载体,制备含目的基因的重组逆转录病毒,感染hMSCs.用逆转录-聚合酶链反应(RTPCR)法检测转基因hMSCs表达HIF-1α的水平,用免疫组织化学法检测转基因hMSCs在缺氧和常氧条件下HIF-1α蛋白的存在情况.体内促血管生成的实验分为两组:实验组采用转基因hMSCs,对照组采用未转基因的hMSCs.两种细胞分别接种到13 d的鸡胚绒毛尿囊膜(CAM),3 d后将CAM制片,在显微镜下观察并摄像.用图像分析方法测量并分析血管面积.结果 转基因hMSCs中HIF-1α mRNA表达较未转基因的hMSCs明显增高.转染HIF-1α基因的hMSCs,缺氧条件下细胞核内HIF-1α能稳定存在;常氧条件下细胞核内HIF-1α不能稳定存在.图像分析结果显示实验组CAM较对照组CAM血管面积明显增多,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 HIF-1α基因能稳定转染到hMSCs并得到强制表达.转染HIF-1α基因的hMSCs有明显的促血管生成作用,对于促进组织工程骨的血管化有重要作用.
作者：胡鸢；段小军；杨柳
来源：中华实验外科杂志 2006 年 23卷 8期
