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目的 构建针对黏蛋白1(MUC1)的特异性小干扰RNA(siRNA)片段,体外观察其对人胆管癌细胞QBC939侵袭力的影响.方法 构建MUC1-siRNA,脂质体法体外转染QBC939,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中MUC1 mRNA的表达,Boyden小室法测定细胞的侵袭力.结果 双酶切、PCR及DNA测序证实MUC1-siRNA真核表达载体构建成功,转染MUC1-siRNA的细胞中MUC1 mRNA表达水平为(0.529±0.011)、明显低于对照组(0.524±0.008)和(0.329±0.010)(P<0.01),且细胞侵袭力(52.56±4.69)也显著低于对照组(160.17±9.79)和(155.67±8.86)(P<0.01).结论 成功构建了特异性MUC1-siRNA表达载体;该载体可有效抑制QBC-939中MUC1 mRNA表达,同时显著降低细胞的侵袭力.

作者:李振振;李灼日;廖春红;李淑芳;吴金术

来源:中华实验外科杂志 2010 年 27卷 11期

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作者:
李振振;李灼日;廖春红;李淑芳;吴金术
来源:
中华实验外科杂志 2010 年 27卷 11期
标签:
胆管癌 RNA干扰 黏蛋白类 Cholangiocarcinoma RNA interference Mucins
目的 构建针对黏蛋白1(MUC1)的特异性小干扰RNA(siRNA)片段,体外观察其对人胆管癌细胞QBC939侵袭力的影响.方法 构建MUC1-siRNA,脂质体法体外转染QBC939,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中MUC1 mRNA的表达,Boyden小室法测定细胞的侵袭力.结果 双酶切、PCR及DNA测序证实MUC1-siRNA真核表达载体构建成功,转染MUC1-siRNA的细胞中MUC1 mRNA表达水平为(0.529±0.011)、明显低于对照组(0.524±0.008)和(0.329±0.010)(P<0.01),且细胞侵袭力(52.56±4.69)也显著低于对照组(160.17±9.79)和(155.67±8.86)(P<0.01).结论 成功构建了特异性MUC1-siRNA表达载体;该载体可有效抑制QBC-939中MUC1 mRNA表达,同时显著降低细胞的侵袭力.