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目的 观察小干扰RNA(siRNA)抑制树突状细胞(DC)中主要组织相容性复合体-Ⅰ(MHC-Ⅰ)类分子的表达,探讨抑制后DC中细胞因子的变化.方法 在最佳干扰浓度,通过流式细胞仪与逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)定量分析方法,选择最能有效抑制DC中MHC-Ⅰ类分子表达的siRNA序列.在对照组、白细胞介素(IL) -10 200 μg,/L组和干扰MHC-Ⅰ表达DC组中,用酶联免疫吸附试验(ELISA)比较IL-12、肿瘤坏死因子(TNF)-α表达量和RT-PCR比较IL-6表达量.结果 在140 nmol/L最佳siRNA转染浓度,siRNA-2干扰组中MHC-Ⅰ的表达量最低.IL-12与TNF-α在空白对照组表达量明显高于IL-10组和siRNA干扰组,差异有统计学意义(P<0.01);IL-6在空白对照组的表达量明显低于IL-10组与siRNA干扰组(P<0.01).结论 在siRNA抑制MHC-Ⅰ表达的DC细胞中,IL-12与TNF-α表达量降低,IL-6表达量升高.

作者:陈春球;丁卫星;尹路

来源:中华实验外科杂志 2012 年 29卷 5期

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作者:
陈春球;丁卫星;尹路
来源:
中华实验外科杂志 2012 年 29卷 5期
标签:
树突状细胞 RNA干扰 免疫耐受 基因表达 Dendritic cells RNA interference Immune tolerance Gene expression
目的 观察小干扰RNA(siRNA)抑制树突状细胞(DC)中主要组织相容性复合体-Ⅰ(MHC-Ⅰ)类分子的表达,探讨抑制后DC中细胞因子的变化.方法 在最佳干扰浓度,通过流式细胞仪与逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)定量分析方法,选择最能有效抑制DC中MHC-Ⅰ类分子表达的siRNA序列.在对照组、白细胞介素(IL) -10 200 μg,/L组和干扰MHC-Ⅰ表达DC组中,用酶联免疫吸附试验(ELISA)比较IL-12、肿瘤坏死因子(TNF)-α表达量和RT-PCR比较IL-6表达量.结果 在140 nmol/L最佳siRNA转染浓度,siRNA-2干扰组中MHC-Ⅰ的表达量最低.IL-12与TNF-α在空白对照组表达量明显高于IL-10组和siRNA干扰组,差异有统计学意义(P<0.01);IL-6在空白对照组的表达量明显低于IL-10组与siRNA干扰组(P<0.01).结论 在siRNA抑制MHC-Ⅰ表达的DC细胞中,IL-12与TNF-α表达量降低,IL-6表达量升高.