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目的 观察Notch信号通路激活或抑制对表皮干细胞增殖和分化的影响.方法 体外分离培养并纯化大鼠表皮干细胞,分组加入Notch信号激活剂Jagged1/FC蛋白(1000 μg/L)和抑制剂γ-分泌酶抑制剂(DAPT,16 μmol/L),空白对照加磷酸盐缓冲液(PBS),共培养48 h后,通过观察各组细胞形态学变化、克隆计数、噻唑蓝(MTT)法检测吸光度(A)值,比较各组表皮干细胞的增殖能力;通过流式细胞仪及免疫细胞组化法检测细胞表面标记物β1整合素(CD29)及角蛋白CK19、CK10的阳性细胞百分比,比较各组表皮干细胞的分化.结果 3组细胞形态无明显差异.分组培养第5天,Jagged1/FC组贴壁细胞的克隆计数为(45.7±3.8)个,显著高于DAPT组[(16.9±2.1)个]及对照组[(33.4±3.1)个,P<0.05];MTT法检测细胞增殖能力,Jagged1/FC组明显高于对照组,DAPT组明显低于对照组(P<0.05);流式细胞仪检测Jagged1/FC组的β1整合素表达率(96.42±2.57)%显著高于DAPT组[(72.58±3.87)%]及阴性对照组[(8 8.75±3.14)%,P<0.05].免疫组织化学CK19阳性细胞百分比Jagged1/FC组明显高于对照组,DAPT组明显低于对照组(P<0.05);而CK10阳性细胞百分比Jagged1/FC组明显低于对照组,DAPT组明显高于对照组(P<0.05).结论 激活Notch信号通路能促进表皮干细胞增殖并维持低分

作者:杨荣华;谢举临;舒斌;张利军;施彦;祁少海

来源:中华实验外科杂志 2013 年 30卷 4期

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作者:
杨荣华;谢举临;舒斌;张利军;施彦;祁少海
来源:
中华实验外科杂志 2013 年 30卷 4期
标签:
表皮干细胞 Notch 增殖 分化 Epidermal stem cell Notch signaling Proliferation Differentiation
目的 观察Notch信号通路激活或抑制对表皮干细胞增殖和分化的影响.方法 体外分离培养并纯化大鼠表皮干细胞,分组加入Notch信号激活剂Jagged1/FC蛋白(1000 μg/L)和抑制剂γ-分泌酶抑制剂(DAPT,16 μmol/L),空白对照加磷酸盐缓冲液(PBS),共培养48 h后,通过观察各组细胞形态学变化、克隆计数、噻唑蓝(MTT)法检测吸光度(A)值,比较各组表皮干细胞的增殖能力;通过流式细胞仪及免疫细胞组化法检测细胞表面标记物β1整合素(CD29)及角蛋白CK19、CK10的阳性细胞百分比,比较各组表皮干细胞的分化.结果 3组细胞形态无明显差异.分组培养第5天,Jagged1/FC组贴壁细胞的克隆计数为(45.7±3.8)个,显著高于DAPT组[(16.9±2.1)个]及对照组[(33.4±3.1)个,P<0.05];MTT法检测细胞增殖能力,Jagged1/FC组明显高于对照组,DAPT组明显低于对照组(P<0.05);流式细胞仪检测Jagged1/FC组的β1整合素表达率(96.42±2.57)%显著高于DAPT组[(72.58±3.87)%]及阴性对照组[(8 8.75±3.14)%,P<0.05].免疫组织化学CK19阳性细胞百分比Jagged1/FC组明显高于对照组,DAPT组明显低于对照组(P<0.05);而CK10阳性细胞百分比Jagged1/FC组明显低于对照组,DAPT组明显高于对照组(P<0.05).结论 激活Notch信号通路能促进表皮干细胞增殖并维持低分