目的 从雄激素受体阳性(AR+)乳腺癌细胞株中分离出乳腺微球体(MSs)进行培养和鉴定.方法 将3种AR+乳腺癌细胞株(MCF-7、MDA-MB-231及T47D)接种在添加生长因子的DMEM/F12培养基中,观察MSs的形成及生长;细胞免疫荧光检测MCF-7、MDA-MB-231及T47D中雄激素受体(AR)的表达;流式细胞术(FCM)检测贴壁细胞及MSs中CD44+ CD24-/low细胞的含量;单克隆形成实验检测MSs细胞的自我更新能力.结果 乳腺癌细胞株在无血清培养基中呈悬浮生长,7~10d可形成MSs;细胞免疫荧光显示MCF-7、T47D中AR主要在细胞质中表达、MDA-MB-231中AR在细胞核及细胞质中均有表达;流式细胞术检测MCF-7、MDA-MB-231及T47D贴壁细胞中CD44+ CD24-/low细胞含量分别为50.0%、86.4%、3.2%,悬浮细胞中CD44+ CD24-/low细胞含量分为87.4%、98.8%、38.4%;克隆形成实验显示随着时间的推移形成的克隆球体积不断增大.结论 悬浮生长的MDA-MB-231及MCF-7细胞可作为研究AR阳性乳腺癌干细胞的良好模型.
作者:刘珊;张巍;刘夏;秦颖;牛昀
来源:中华实验外科杂志 2014 年 31卷 1期