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目的 观察在细胞水平臭氧氧化预处理(OzoneOP)对大鼠肾小管上皮细胞再灌注损伤后的保护作用.方法 细胞同步化24 h后分成3组,正常组、缺血再灌注(I/R)组和OzoneOP组.正常组:更换对照缓冲液1 ml,3h后更换2 ml完全培养液培养24 h.I/R组:更换缺血缓冲液1 ml,置于三气培养箱中3h模拟缺血,后更换2 ml完全培养液在正常条件下培养24 h模拟再灌注.OzoneOP组:在模拟缺血前,加入2 ml臭氧化的培养液并作用2h,余同I/R组.采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,并进行超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的检测,Western blot检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)的表达.结果 正常组、I/R组和OzoneOP组的凋亡率分别为(4.58±0.35)%、(32.16±3.27)%、(18.73±1.52)%,SOD活性分别为(14.31 ±1.31)、(7.03±3.94)、(10.45 ±2.35) U/mg蛋白,MDA含量分别为(0.48±0.12)、(2.13±1.44)、(1.36±0.59) nmol/mg蛋白.I/R组与正常组比较,bcl-2/bax比率的降低(P<0.05),而OzoneOP可以提高bcl-2/bax的表达比率(P<0.05).结论 臭氧氧化预处理对肾小管上皮细胞的I/R损伤具有保护作用,其机制可能通过调节bcl-2/bax的比率来实现.

作者:王磊;刘修恒;陈志远;陈晖;翁小东;邱涛;刘林

来源:中华实验外科杂志 2014 年 31卷 6期

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作者:
王磊;刘修恒;陈志远;陈晖;翁小东;邱涛;刘林
来源:
中华实验外科杂志 2014 年 31卷 6期
标签:
臭氧氧化预处理 缺血再灌注损伤 肾小管上皮细胞 Ozone oxidative preconditioning Ischemia and reperfusion injury Renal tubular epithelial cell
目的 观察在细胞水平臭氧氧化预处理(OzoneOP)对大鼠肾小管上皮细胞再灌注损伤后的保护作用.方法 细胞同步化24 h后分成3组,正常组、缺血再灌注(I/R)组和OzoneOP组.正常组:更换对照缓冲液1 ml,3h后更换2 ml完全培养液培养24 h.I/R组:更换缺血缓冲液1 ml,置于三气培养箱中3h模拟缺血,后更换2 ml完全培养液在正常条件下培养24 h模拟再灌注.OzoneOP组:在模拟缺血前,加入2 ml臭氧化的培养液并作用2h,余同I/R组.采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,并进行超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的检测,Western blot检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)的表达.结果 正常组、I/R组和OzoneOP组的凋亡率分别为(4.58±0.35)%、(32.16±3.27)%、(18.73±1.52)%,SOD活性分别为(14.31 ±1.31)、(7.03±3.94)、(10.45 ±2.35) U/mg蛋白,MDA含量分别为(0.48±0.12)、(2.13±1.44)、(1.36±0.59) nmol/mg蛋白.I/R组与正常组比较,bcl-2/bax比率的降低(P<0.05),而OzoneOP可以提高bcl-2/bax的表达比率(P<0.05).结论 臭氧氧化预处理对肾小管上皮细胞的I/R损伤具有保护作用,其机制可能通过调节bcl-2/bax的比率来实现.