目的 人工合成与微小RNA(miRNA,miR)-1236所作用的p21基因启动子靶序列完全互补配对的4对小分子双链RNA(dsRNA):dsP21-242、dsP21-243、dsP21-244和dsP21-245(dsP21-243序列配对程度最高),分别观察其与miR-1236在激活人膀胱癌细胞株T24和EJ细胞中抑癌基因p21表达能力的差异.方法 参照小激活RNA(saRNA)的设计原则设计合成4对dsRNA.分别转染阴性对照组(dsControl)、阳性对照组(miR-1236)和实验组(dsRNA)至T24和EJ细胞,通过实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot分别检测p21 mRNA和蛋白表达的水平.结果 FQ-PCR检测结果显示实验组中仅dsP21-245能明显促进两种细胞中pZ1mRNA水平的升高;且与阴性对照组比较,dsP21-245分别上调T24和EJ细胞中p21 mRNA的表达至2.32倍(P＜0.01)和2.84倍(P＜0.01);与阳性对照组比较,两种细胞株中p21 mRNA的表达差异均没有统计学意义(P＞0.05).RT-PCR检测结果证实了p21 mRNA表达变化的趋势.Western blot结果显示在两种细胞株中p21蛋白表达水平的升高与p21 mRNA水平的上调一致.其余3对dsRNA均未能显著上调两种细胞株中p21基因的表达(P＞0.05).结论 人工合成的dsP21-245能显著促进膀胱癌细胞中p21的高表达,且与miR-1236激活p21表达的能力差异无

作者：盖强强；汪成合；陈忠；张庆松；杨为民；叶章群

来源：中华实验外科杂志 2016 年 33卷 12期