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目的 探讨CXC趋化因子配体12(CXCL12)/CXC趋化因子受体4(CXCR4)生物轴在吉西他滨(GEM)对胆管癌细胞上皮-间充质转化(EMT)及侵袭转移影响中的作用机制.方法 利用基质细胞源性因子-1α(SDF-1α,100 ng/ml)激活高表达CXCR4的胆管癌细胞的CXCL12/CXCR4生物轴建立体外模型,将胆管癌RBE细胞随机分为正常对照组和吉西他滨组.应用噻唑蓝(MTT)的方法检测增殖率,应用Transwell小室观察细胞的侵袭转移.应用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测不同浓度GEM对CXCR4 mRNA及蛋白表达的影响,应用Western blot检测侵袭转移相关因子血管内皮生长因子-C(VEGF-C)、基质金属蛋白酶(MMP)-9,以及EMT相关N-钙黏蛋白(N-cadherin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白表达变化.结果 吉西他滨组细胞生存率分别为76.65%、71.40%、52.25%,生存率明显下降;吉西他滨组[(282.00 ±3.45)个/视野]细胞侵袭转移大于对照组[(168.00±2.49)个/视野];吉西他滨组CXCR4蛋白(0.965±0.163、1.895±0.191、3.975±0.120、3.355±0.163、3.572±0.198、6.154 ±0.113)及mRNA(1.021±0.210、2.442±0.556、2.774±0.146、2.961±0.275、3.279±0.228、5.010±0.826)随浓度提高表达上调;吉两他滨组与对照组比较,CXCR4、VEGF-C、MMP-9(1.

作者:刘兵;王文斌;刘三光;张腾飞;王天阳;刘学青;吕海涛

来源:中华实验外科杂志 2016 年 33卷 12期

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作者:
刘兵;王文斌;刘三光;张腾飞;王天阳;刘学青;吕海涛
来源:
中华实验外科杂志 2016 年 33卷 12期
标签:
吉西他滨 胆管癌 CXC趋化因子受体4 CXC趋化因子配体12 上皮-间充质转化 转移 Gemcitabine Cholangiocarcinoma CXC chemokine receptor 4 CXC chemokine ligand 12 Epithelial-mesenchymal transtion Metastasis
目的 探讨CXC趋化因子配体12(CXCL12)/CXC趋化因子受体4(CXCR4)生物轴在吉西他滨(GEM)对胆管癌细胞上皮-间充质转化(EMT)及侵袭转移影响中的作用机制.方法 利用基质细胞源性因子-1α(SDF-1α,100 ng/ml)激活高表达CXCR4的胆管癌细胞的CXCL12/CXCR4生物轴建立体外模型,将胆管癌RBE细胞随机分为正常对照组和吉西他滨组.应用噻唑蓝(MTT)的方法检测增殖率,应用Transwell小室观察细胞的侵袭转移.应用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测不同浓度GEM对CXCR4 mRNA及蛋白表达的影响,应用Western blot检测侵袭转移相关因子血管内皮生长因子-C(VEGF-C)、基质金属蛋白酶(MMP)-9,以及EMT相关N-钙黏蛋白(N-cadherin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白表达变化.结果 吉西他滨组细胞生存率分别为76.65%、71.40%、52.25%,生存率明显下降;吉西他滨组[(282.00 ±3.45)个/视野]细胞侵袭转移大于对照组[(168.00±2.49)个/视野];吉西他滨组CXCR4蛋白(0.965±0.163、1.895±0.191、3.975±0.120、3.355±0.163、3.572±0.198、6.154 ±0.113)及mRNA(1.021±0.210、2.442±0.556、2.774±0.146、2.961±0.275、3.279±0.228、5.010±0.826)随浓度提高表达上调;吉两他滨组与对照组比较,CXCR4、VEGF-C、MMP-9(1.