目的 观察乙肝病毒X蛋白(HBX)表达对宿主细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和活性氧(ROS)的影响.方法 在正常肝细胞系LO2中过表达HBX蛋白;利用Western blot和ROS检测剂双氯荧光素(DCFH-DA)检测HMGB1的表达、ROS的产生和核因子(NF)-κB信号通路的变化;然后利用NF-κB和ROS的激活剂分别刺激细胞,验证NF-κB对HMGB1和ROS的调节作用.结果 Western blot结果显示HBX的过表达显著抑制HMGB1的表达,下调2.4倍(P =0.025).通过对绿色荧光的观察发现HBX对ROS的产生具有抑制作用.Western blot结果证明HBX过表达可以抑制NF-κB(p65)及其抑制子IκB的磷酸化;鱼藤酮和LPS分别刺激HBX过表达细胞后发现,NF-κB(p65)及其抑制子IκB的磷酸化增强、HMGB1、ROS和Toll样受体4(TLR4)的表达量增加,提示HMGB1与NF-κB信号通路间是相互正调控关系.结论 HBX通过抑制NF-κB信号通路,进而抑制HMGB1的表达和ROS的产生,同时抑制宿主细胞对炎性细胞因子的释放.
作者:王高雄;王炜;王艳军;黄天从;陈文炜;李新丰;王英超
来源:中华实验外科杂志 2018 年 35卷 1期