目的 观察外源性胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)对诱导软骨细胞凋亡的效应,探讨其是否通过“细胞核内蛋白Nur77-线粒体易位途径”诱导凋亡.方法 原代培养大鼠软骨细胞并传代2～3次后,转入无血清培养培养环境,添加不同浓度的外源性IGFBP-3以及设置对照组,同时处理24 h后,分别通过普通及荧光显微镜观察IGFBP-3对软骨细胞的形态学影响、细胞计数试剂盒(CCK-8)吸光度法和流式细胞仪检测软骨细胞凋亡比例、激光共聚交显微镜观察IGFBP-3诱导细胞核内受体Nur77.结果 (1)原代培养的单个软骨细胞贴壁后呈不规则多边形,生长至融合时呈“铺路石样”,经过数次传代,细胞由多边形逐渐伸展为成纤维细胞样;(2)普通明场和荧光显微镜下,均可见凋亡小体,表明外源性IGFBP-3软骨细胞能诱导软骨细胞凋亡;(3)CCK-8数值:空白组为1.43±0.03;阴性对照组为1.44±0.05;IGFBP-3组(0.5、1.0μg/ml与2.0μg/ml)分别为1.31±0.03、1.06±0.07、0.82±0.10;空白组与阴性对照组差异无统计学意义(P=0.845),IGFBP-3组内差异有统计学意义(P =0.000、0.000),IGFBP-3组与空白组和阴性对照组分别差异有统计学意义(P=0.000);(4)流式细胞仪结果:空白组为97.57％;阴性对照组为97.63％;IGFBP-3组(0.5 ～2.0μg/ml)分别为90.03％、80.03％和67.3

作者：韦准；李皓桓；刘远翔；张小龙；谢威；万震宇

来源：中华实验外科杂志 2018 年 35卷 3期