目的 探讨核因子-κB(NF-κB)抑制剂四氢化吡咯二硫代氨基甲酸酯(PDTC)对胶质瘤干细胞(GSLC)放疗增敏的作用和机制.方法 用无血清悬浮培养方法培养胶质瘤干细胞U87-sph,并用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)测定干细胞标志物的表达.用Westem blot比较放疗后不同时间点U87与U87-sph中NF-κB及p-NF-κB表达.用膜联蛋白Ⅴ(Annexin Ⅴ)-异硫氰酸荧光素(FITC)/碘化丙锭(PI)双染方法检测单独PDTC、单独放疗、PDTC联合放疗等不同分组的U87和U87-sph的凋亡率.采用Western blot检测U87-sph在PDTC联合放疗时凋亡相关蛋白及NF-κB通路蛋白的表达.结果 RT-PCR检测U87-sph中干细胞标志物的表达较其亲本细胞株增加.Western blot结果显示X射线照射后不同时间点,U87-sph中p-NF-κB/p65表达明显增加(P=0.001),且呈时间依赖性.而在U87细胞中变化不明显(P=0.059).U87-sph的单独PDTC处理组,单独放疗组和PDTC联合放疗组的凋亡率与对照组比较依次增加(1.10±0.07)倍(P =0.651)、(1.49 ±0.12)倍(P =0.009)、(3.20 ±0.19)倍(P=0.005).PDTC联合放疗组的凋亡率与单独PDTC组、单独放疗组比较均明显增加(P =0.003,P=0.004).Western blot结果显示U87-sph的PDTC联合放疗组中剪切型半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-8与剪切

作者：刘俊峰；谢涛；刘羽；罗龙军；徐成；沈璐；雷霆；叶飞

来源：中华实验外科杂志 2018 年 35卷 9期