目的 观察COL10A1在头颈鳞癌(HNSCC)组织中的表达,探讨通过短发卡RNA(shRNA)抑制COL10A1表达对HNSCC细胞的作用.方法 通过Oncomine数据库和我院收集的7例配对的肿瘤及其正常组织,验证COL10A1蛋白的表达.进一步在细胞株Fadu、Cal-27中检测COL10A1蛋白的表达.以shRNA沉默COL10A1基因后,利用噻唑蓝比色和平板克隆实验检测HNSCC细胞增殖和克隆形成能力,Transwell迁移和侵袭实验验证细胞迁移和侵袭能力.蛋白质印迹实验探讨COL10A1抑制与肿瘤上皮-间充质转化(EMT)之间的联系.结果 Oncomine数据库荟萃分析提示COL10A1在HNSCC中高表达(中位秩92.0,P=0.000);我院组织标本验证COL10A1在HNSCC中表达增高(P=0.001);同时验证其蛋白的表达水平在HNSCC细胞株(Fadu、Cal-27)中,也较正常上皮细胞中增高.进一步成功合成针对COL10A1的shRNA片段,其抑制效率高达80％;沉默COL10A1后,噻唑蓝(MTT)实验显示Fadu-shRNA组和对照组比较,shRNA组受到抑制(F =234.301 P=0.002),抑制作用随着时间的增加而增加(t=12.814,P=0.017);Cal-27-shRNA组和对照组比较,shRNA组也受到抑制(F=184.001,P=0.028),抑制作用随着时间的增加而增加(t=10.214,P=0.026),两组间比较差异无统计学意义(P =0.067).平板克隆实验显示Fadu-shR-NA、Cal-7-shRNA组单

作者：崔萌；杜伟；罗瑞华；刘善廷；齐金星

来源：中华实验外科杂志 2018 年 35卷 11期