目的 观察高铁培养环境下小鼠成肌细胞C2C12生物学活性指标的变化,探讨高铁应激对骨骼肌细胞生物学活性的影响和相关机制.方法 体外培养小鼠成肌细胞C2C12,在马血清诱导作用下分化为骨骼肌细胞,以不同浓度(50、100、200 μmol/L)枸橼酸铁铵(FAC)干预,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡率,活性氧(ROS)检测试剂盒检测细胞内ROS水平,线粒体荧光探针标记线粒体,流式细胞仪检测细胞内线粒体相对含量,Western blot法检测细胞内自噬相关蛋白轻链蛋白3Ⅰ、Ⅱ(LC3 Ⅰ、LC3Ⅱ)、B淋巴细胞瘤2/腺病毒相互作用蛋白3及其同族体(BNIP3、BNIP3L)的表达;Western blot法分别检测细胞色素C(Cyt C)在细胞质和线粒体内的表达,使用抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC 2.5 mmol/L)和FAC共同干预,再次检测细胞的增殖、凋亡指标.结果 C2C12细胞在FAC干预后,细胞的增殖活性随FAC干预浓度增加呈浓度依赖性下降(P＜0.01),凋亡率呈浓度依赖性升高(P＜0.01);ROS水平呈浓度依赖性升高(P＜0.01);线粒体含量呈浓度依赖性升高(P＜0.01);LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ、BNIP3、BNIP3L蛋白的表达呈浓度依赖性增加(P＜0.01);Cyt C胞质/线粒体蛋白的表达呈浓度依赖性增加(P＜0.01);加入NAC后,FAC+ NAC组、FAC组细胞增殖活性终值分别为1.46 ±0
作者：赵国阳；王莹；王波；狄东华
来源：中华实验外科杂志 2019 年 36卷 1期
