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目的 探讨微小RNA-130b(miR-130b)对胃癌细胞BGC-823增殖凋亡的影响及作用机制.方法 实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测miR-130b在38例胃癌患者肿瘤组织及癌旁组织中的表达;瞬时转染miR-130b模拟物/抑制剂、第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)小干扰RNA(siRNA)进入胃癌细胞,检测细胞增殖、周期、凋亡以及凋亡相关蛋白变化情况;双荧光素酶报告基因实验验证miR-130b靶向调控PTEN,Western blot检测PTEN/蛋白激酶B(Akt)通路相关蛋白表达变化.结果 miR-130b在胃癌肿瘤组织中表达水平显著高于癌旁组织(8.048±0.508比2.689±0.243,P<0.01);过表达miR-130b促进肿瘤细胞增殖(1.722±0.122比0.910±0.095,P<0.01),下调miR-130b抑制肿瘤细胞增殖(0.369±0.032比1.023±0.072,P<0.01),下调PTEN逆转miR-130b抑制剂的细胞增殖抑制作用(0.781±0.032比0.369±0.032,P<0.01);下调miR-130b增加肿瘤细胞凋亡率[(20.54±1.56)%比(12.86±1.35)%,P<0.05]和细胞周期G1期细胞数量[(50.50 ±0.78)%比(35.50 ±0.64)%,P<0.01],并且降低凋亡相关蛋白表达;miR-130b+ PTEN-3'端非编码区(3'UTR)-wt荧光素酶活性较对照组显著降低(0.469±0.099,P<0.01),而miR-130b+ PTEN-3'UTR-mut荧光素酶活性较对照

作者:陈华;胡海军;刘宁;单爱军;刘颖

来源:中华实验外科杂志 2019 年 36卷 3期

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作者:
陈华;胡海军;刘宁;单爱军;刘颖
来源:
中华实验外科杂志 2019 年 36卷 3期
标签:
胃癌细胞 微小RNA-130b 增殖 凋亡 第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因/蛋白激酶B Gastric cancer cell MicroRNA-130b Proliferation Apoptosis Phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome ten/Protein kinase B
目的 探讨微小RNA-130b(miR-130b)对胃癌细胞BGC-823增殖凋亡的影响及作用机制.方法 实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测miR-130b在38例胃癌患者肿瘤组织及癌旁组织中的表达;瞬时转染miR-130b模拟物/抑制剂、第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)小干扰RNA(siRNA)进入胃癌细胞,检测细胞增殖、周期、凋亡以及凋亡相关蛋白变化情况;双荧光素酶报告基因实验验证miR-130b靶向调控PTEN,Western blot检测PTEN/蛋白激酶B(Akt)通路相关蛋白表达变化.结果 miR-130b在胃癌肿瘤组织中表达水平显著高于癌旁组织(8.048±0.508比2.689±0.243,P<0.01);过表达miR-130b促进肿瘤细胞增殖(1.722±0.122比0.910±0.095,P<0.01),下调miR-130b抑制肿瘤细胞增殖(0.369±0.032比1.023±0.072,P<0.01),下调PTEN逆转miR-130b抑制剂的细胞增殖抑制作用(0.781±0.032比0.369±0.032,P<0.01);下调miR-130b增加肿瘤细胞凋亡率[(20.54±1.56)%比(12.86±1.35)%,P<0.05]和细胞周期G1期细胞数量[(50.50 ±0.78)%比(35.50 ±0.64)%,P<0.01],并且降低凋亡相关蛋白表达;miR-130b+ PTEN-3'端非编码区(3'UTR)-wt荧光素酶活性较对照组显著降低(0.469±0.099,P<0.01),而miR-130b+ PTEN-3'UTR-mut荧光素酶活性较对照