目的 观察L型氨基酸转运载体1(LAT1)对结直肠癌细胞增殖和迁移能力的影响.方法 设计并合成靶向LAT1的小干扰RNA(siLAT1)和阴性对照小干扰RNA(siCON),并在结直肠癌细胞株HT29中进行转染,48 h后利用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测目的基因mRNA和蛋白水平的表达,进行敲降效率的验证.利用细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测干扰组(siLAT1组)和阴性对照组(siCON组)细胞增殖,利用Transwell实验检测siLAT1组和siCON组细胞的迁移能力.结果 siLAT1和siCON瞬时转染HT29细胞48 h后,siLAT1对HT29细胞LAT1 mRNA表达的抑制率为(73.2±5.2)％,差异有统计学意义(t=11.410,P＜0.01).Western blot结果进一步证实靶向LAT1的小干扰RNA(siRNA)的敲减效率(0.68±0.06比0.21±0.04,t=4.492,P＜0.05).CCK-8实验表明LAT1基因敲降后的细胞株HT29增殖能力弱于阴性对照组(P＜0.01).Transwell迁移实验表明在转染后siLAT1组迁移细胞数明显小于阴性对照组(66 ±11比156±29,t=5.083,P＜0.05).结论 LAT1表达下调抑制了结直肠癌肿瘤细胞的增殖和迁移过程.
作者：杨张朔；王昕；杨铁成；黄牛；孔秀英；黄智民；卢作鹏；习一清；冯茂辉
来源：中华实验外科杂志 2019 年 36卷 10期
