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目的 探讨p21活化激酶4(PAK4)对乳腺癌细胞增殖和干细胞特性的影响及其作用机制.方法:采用乳腺癌MCF-7细胞构建短发卡RNA (shRNA)-NC和shRNA-PAK4慢病毒稳定细胞系,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测PAK4 mRNA表达水平;采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖;采用Transwell分析细胞侵袭能力;采用微球体形成实验分析乳腺癌细胞的干细胞特性;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测乳腺癌干细胞标志分子乙醛脱氢酶1(ALDH1)和Oct-4的表达.结果 与shRNA-NC细胞比较(1.71±0.14),shRNA-PAK4细胞中PAK4的mRNA表达水平明显下调(0.57±0.05),差异有统计学意义(t=3.725,P<0.05);与shRNA-NC细胞比较(1.76±0.14),shRNA-PAK4细胞的增殖能力显著下降(0.66±0.04),差异有统计学意义(t=3.572,P<0.05);Transwell结果显示shRNA-PAK4细胞的侵袭能力(58.06±7.73)较shRNA-NC细胞(92.18±11.35)显著下降,差异有统计学意义(t=2.850,P<0.05);Western blot结果显示,与shRNA-NC细胞比较(1.48±0.12、2.16 ±0.18),shRNA-PAK4细胞中ALDH1和Oct-4的蛋白表达水平明显下降(0.40 ±0.04、0.77 ±0.06),差异有统计学意义(t=4.361、3.505,P<0.05).结论 PAK4可通过正向调控ALDH1和Oct-4的表达改变乳腺癌细胞的干细胞特性,

作者:梁栋;尤伟;杨秦蘅;吕峰;李娜;闫园

来源:中华实验外科杂志 2019 年 36卷 11期

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作者:
梁栋;尤伟;杨秦蘅;吕峰;李娜;闫园
来源:
中华实验外科杂志 2019 年 36卷 11期
标签:
p21活化激酶4 乳腺癌 增殖 侵袭 肿瘤干细胞 p21-activated protein kinase 4 Breast cancer Proliferation Invasion Cancer stem cell
目的 探讨p21活化激酶4(PAK4)对乳腺癌细胞增殖和干细胞特性的影响及其作用机制.方法:采用乳腺癌MCF-7细胞构建短发卡RNA (shRNA)-NC和shRNA-PAK4慢病毒稳定细胞系,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测PAK4 mRNA表达水平;采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖;采用Transwell分析细胞侵袭能力;采用微球体形成实验分析乳腺癌细胞的干细胞特性;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测乳腺癌干细胞标志分子乙醛脱氢酶1(ALDH1)和Oct-4的表达.结果 与shRNA-NC细胞比较(1.71±0.14),shRNA-PAK4细胞中PAK4的mRNA表达水平明显下调(0.57±0.05),差异有统计学意义(t=3.725,P<0.05);与shRNA-NC细胞比较(1.76±0.14),shRNA-PAK4细胞的增殖能力显著下降(0.66±0.04),差异有统计学意义(t=3.572,P<0.05);Transwell结果显示shRNA-PAK4细胞的侵袭能力(58.06±7.73)较shRNA-NC细胞(92.18±11.35)显著下降,差异有统计学意义(t=2.850,P<0.05);Western blot结果显示,与shRNA-NC细胞比较(1.48±0.12、2.16 ±0.18),shRNA-PAK4细胞中ALDH1和Oct-4的蛋白表达水平明显下降(0.40 ±0.04、0.77 ±0.06),差异有统计学意义(t=4.361、3.505,P<0.05).结论 PAK4可通过正向调控ALDH1和Oct-4的表达改变乳腺癌细胞的干细胞特性,