目的:观察SW1353细胞中唾液酸酶3(NEU3)表达及定位情况，探究过表达NEU3对人软骨肉瘤SW1353细胞增殖及迁移能力的影响。方法:用Lipo3000转染试剂构建NEU3过表达细胞株，实验分组为4组：空白对照组un，不予任何处理；条件对照组blank，加入等剂量转染试剂；阴性对照组pcon，加入空载质粒；处理组pNEU3，加入NEU3基因过表达质粒。并用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)验证细胞株NEU3 mRNA表达水平，蛋白质印迹法(Western blot)验证细胞株NEU3蛋白表达水平。采用划痕实验检测NEU3过表达对人软骨肉瘤SW1353细胞迁移的影响。利用EdU增殖实验、细胞计数试剂盒(CCK-8)增殖实验检测NEU3过表达对软骨肉瘤细胞SW1353增殖的影响。用独立样本
t检验比较转染前后NEU3 mRNA水平及细胞增殖、迁移能力差异。
结果:转染NEU3基因过表达质粒后，Real-time PCR结果显示，NEU3基因mRNA显著上调(
t＝5.622，
P<0.05)，差异有统计学意义。EDU增殖实验结果显示，NEU3过表达后软骨肉瘤细胞SW1353增殖速度显著增加[对照组阳性率细胞分别为(6.56±2.29)
作者：杨晓；张悦；吴衣论；王琳；王滋润
来源：中华实验外科杂志 2020 年 37卷 1期
