目的:检测长链非编码RNA(lncRNA) loc285194在胃癌细胞株中的表达及其对增殖和凋亡的影响,并探讨其机制。方法:收集4个胃癌细胞株(MGC-803、Hs746T、AGS、BSG823)及1个胃黏膜上皮细胞株GES-1(均购自美国典型菌种保藏中心),利用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)测定lncRNA loc285194在胃癌和胃黏膜上皮细胞株中的表达。MGC-803细胞培养后分成3组,即lncRNA loc285194过表达组(lncRNA loc285194组)、阴性对照组(Vector组)、空白对照组(Blank组),分别经重组慢病毒转染loc255194过表达序列(LV-loc255194)、阴性对照序列(LV-NC),Blank组仅给予空白对照。RT-qPCR测定3组病毒转染效率,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测增殖,流式细胞术检测凋亡,蛋白质印迹法测定p53、裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)及β-肌动蛋白(β-actin)的表达。3组间的比较采用方差分析,在有意义的基础上两组间比较采用LSD-
T检验。
结果:胃癌细胞株MGC-803、Hs746T、AGS、BSG823中lncRNA loc285194相对表达量低于胃黏膜上皮细胞株GES-1(
F=18.432,
P<0.05)。lncRNA loc285194组lncRNA loc285194相对表达量高于Vector组(
t=8.487,
P<0.01),提示转染成功。细胞铺
作者:冯艳坤;潘虹;鄢艳红
来源:中华实验外科杂志 2020 年 37卷 7期