目的:观察去分化脂肪细胞(DFAT)对巨噬细胞极化的影响。方法:分别向培养液中加入脂多糖(LPS)或白细胞介素4(IL-4),诱导RAW264.7向M1或M2型巨噬细胞极化。分离培养C57BL/6小鼠DFAT,并对其进行多向分化诱导,通过油红O染色、茜素红染色进行成脂、成骨干性鉴定,利用Transwell小室将DFAT与巨噬细胞共培养24 h,在显微镜下观察巨噬细胞形态变化,通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测M1型巨噬细胞相关基因诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、人巨噬细胞趋化蛋白-1 (MCP-1)、肿瘤坏死因子α (TNF-α)和M2型巨噬细胞相关基因精氨酸酶-1 (Arg-1)、壳酶蛋白(Ym-1)、白细胞介素-10(IL-10)表达量的变化。组间比较采用
t检验。
结果:加入LPS或IL-4刺激,可诱导RAW264.7向M1或M2型巨噬细胞极化。将DFAT细胞与巨噬细胞共培养发现,DFAT细胞可使巨噬细胞的形态发生明显变化,M1组和对照组M0组比较,M1型巨噬细胞相关基因TNF-α的表达显著增高(5.02±0.71比1.00±0.02,
t=5.648,
P<0.01)、iNOS的表达显著增高(7.44±1.56比1.00±0.06,
t=4.143,
P<0.01)、MCP1的表达显著增高(19.64±2.48比1.00±0.04,
t=7.510,
P<0.01);M2组M0组比较,M2型巨噬细胞相关基因
作者:刘士强;张钰;熊绍恒;董琛;黄兆松;刘恒鑫;宋雅娟;余州;马显杰
来源:中华实验外科杂志 2022 年 39卷 2期