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目的:探讨长链非编码RNA HCG22(lncRNA HCG22)对胃癌细胞生物学行为的影响及其机制。方法:实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测正常胃上皮细胞GES-1和胃癌MGC-803、SGC-7901细胞lncRNA HCG22的表达;采用慢病毒过表达和对照载体感染MGC-803细胞,分为过表达组(LV-HCG22-OE)、对照组(LV-NC)和空白组(Blank);细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测24、48、72 h的吸光度值,集落形成实验检测细胞集落形成率;划痕愈合实验检测迁移能力;流式细胞术分析周期和凋亡;免疫荧光观察半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)荧光;蛋白质印迹法(Western blot)检测凋亡蛋白、自噬标志物以及蛋白激酶B(Akt)/P70S6激酶(P70S6K)通路蛋白的变化。两组间比较采用 t检验。 结果:lncRNA HCG22在MGC-803(0.026±0.011)和SGC-7901的表达(0.048±0.012)低于GES-1细胞(1.000±0.123, t=7.871、7.694, P<0.01)。上调lncRNA HCG22后,抑制细胞的增殖能力,LV-HCG22-OE组的吸光度值低于LV-NC组(24 h为0.295±0.015比0.501±0.014,48 h为0.526±0.012比0.952±0.048,72 h为0.929±0.016比1.381±0.020, t=10.170、8.614、17.800, P<0.01);集落形成率[(36.250±2.000)

作者:张牙;张卓奇;问明;郭剑;冯长平;彭鑫宇;李杰;张爱民

来源:中华实验外科杂志 2022 年 39卷 6期

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作者:
张牙;张卓奇;问明;郭剑;冯长平;彭鑫宇;李杰;张爱民
来源:
中华实验外科杂志 2022 年 39卷 6期
标签:
胃癌 长链非编码RNA 生物学行为 蛋白激酶B/P70S6激酶 Gastric cancer Long non-coding RNA Biological behavior Protein kinase B/P70S6 kinase
目的:探讨长链非编码RNA HCG22(lncRNA HCG22)对胃癌细胞生物学行为的影响及其机制。方法:实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测正常胃上皮细胞GES-1和胃癌MGC-803、SGC-7901细胞lncRNA HCG22的表达;采用慢病毒过表达和对照载体感染MGC-803细胞,分为过表达组(LV-HCG22-OE)、对照组(LV-NC)和空白组(Blank);细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测24、48、72 h的吸光度值,集落形成实验检测细胞集落形成率;划痕愈合实验检测迁移能力;流式细胞术分析周期和凋亡;免疫荧光观察半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)荧光;蛋白质印迹法(Western blot)检测凋亡蛋白、自噬标志物以及蛋白激酶B(Akt)/P70S6激酶(P70S6K)通路蛋白的变化。两组间比较采用 t检验。 结果:lncRNA HCG22在MGC-803(0.026±0.011)和SGC-7901的表达(0.048±0.012)低于GES-1细胞(1.000±0.123, t=7.871、7.694, P<0.01)。上调lncRNA HCG22后,抑制细胞的增殖能力,LV-HCG22-OE组的吸光度值低于LV-NC组(24 h为0.295±0.015比0.501±0.014,48 h为0.526±0.012比0.952±0.048,72 h为0.929±0.016比1.381±0.020, t=10.170、8.614、17.800, P<0.01);集落形成率[(36.250±2.000)