目的通过建立葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)的基因转染系统,观察GLUT1的过度表达对系膜细胞功能的影响.方法利用逆转录病毒载体建立CLUT1基因转染的大鼠系膜细胞(MCGT1),以β-半乳糖苷酶转染细胞(MCLacZ)为对照.用2-脱氧-3H-萄萄糖(2-DG)测定细胞葡萄糖摄入,流式细胞仪分析细胞表型,3H-脯氨酸掺入和流式细胞仪分别检测细胞胶原和纤维连接蛋白(FN)的合成,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞胶原Ⅳ、FN的表达.结果MCGT1的2-DG摄入率明显高于MCLacZ[(741.0±60.5)dpm·μgprot-1比(92.2±9.0)dpm·μgprot-1,P<0.01].动力学分析发现MCGT1的Vmax是MCLacZ的3.7倍,而两者Km值无明显差别.在相同的葡萄糖浓度下,MCGT1的乳酸生成增多,表现出细胞体积增大、RNA/DNA和蛋白质/DNA比值增高等细胞肥大表型.与对照相比,MCGT1的胶原和FN合成与表达明显增加.结论GLUT1的过度表达使系膜细胞具有糖尿病肾病(DN)的细胞表型.GLUT1的功能状态直接影响系膜细胞的糖代谢及功能变化.
作者：李颖健；刘志红；刘栋；朱加明；郭啸华；黎磊石
来源：中华肾脏病杂志 2000 年 16卷 6期
