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目的观察骨成形蛋白7(BMP-7)对TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞转分化的影响,以探讨其延缓小管间质纤维化病变的作用及其可能机制.方法将体外培养的人肾小管上皮细胞分为空白对照组、TGF-β1组、TGF-β1+50 ng/ml BMP-7组、TGF-β1+100 ng/ml BMP-7组.应用MTT比色法测定BMP-7对人肾小管上皮细胞增殖的作用;间接免疫荧光法测定人肾小管上皮细胞α-SMA、角蛋白、波形蛋白的表达;流式细胞仪检测表达α-SMA阳性的HK-2细胞百分率;RT-PCR检测细胞中α-SMA mRNA的表达.结果与空白对照组相比,不同浓度的BMP-7处理HK-2细胞24、48 h后,HK-2细胞均明显增殖(P<0.05).免疫荧光检测结果显示,经TGF-β1刺激后,角蛋白表达减弱,α-SMA和波形蛋白表达增强;加入50 ng/ml BMP-7处理24、48 h后,细胞中α-SMA和波形蛋白表达减弱.流式细胞仪检测发现,加入50 ng/ml BMP-7处理24、48 h后,表达α-SMA的HK-2细胞阳性率逐渐下降,与TGF-β1处理组相比差异有显著性意义(P<0.05).RT-PCR结果显示,空白对照组无α-SMA mRNA表达,5 ng/ml TGF-β1组与空白对照组相比,α-SMA mRNA表达明显上调(P<0.05),而TGF-β1+50 ng/ml BMP-7组、TGF-β1+100 ng/ml BMP-7组与TGF-β1组相比,α-SMAmRNA表达有下降趋势,但无显著性差异(P>0.05).结论 TGF-β

作者:陈楠;李娅;刘峰;严富洪

来源:中华肾脏病杂志 2004 年 20卷 5期

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作者:
陈楠;李娅;刘峰;严富洪
来源:
中华肾脏病杂志 2004 年 20卷 5期
标签:
骨形态发生蛋白质类 肾小管上皮细胞 肌成纤维细胞 转分化 增殖
目的观察骨成形蛋白7(BMP-7)对TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞转分化的影响,以探讨其延缓小管间质纤维化病变的作用及其可能机制.方法将体外培养的人肾小管上皮细胞分为空白对照组、TGF-β1组、TGF-β1+50 ng/ml BMP-7组、TGF-β1+100 ng/ml BMP-7组.应用MTT比色法测定BMP-7对人肾小管上皮细胞增殖的作用;间接免疫荧光法测定人肾小管上皮细胞α-SMA、角蛋白、波形蛋白的表达;流式细胞仪检测表达α-SMA阳性的HK-2细胞百分率;RT-PCR检测细胞中α-SMA mRNA的表达.结果与空白对照组相比,不同浓度的BMP-7处理HK-2细胞24、48 h后,HK-2细胞均明显增殖(P<0.05).免疫荧光检测结果显示,经TGF-β1刺激后,角蛋白表达减弱,α-SMA和波形蛋白表达增强;加入50 ng/ml BMP-7处理24、48 h后,细胞中α-SMA和波形蛋白表达减弱.流式细胞仪检测发现,加入50 ng/ml BMP-7处理24、48 h后,表达α-SMA的HK-2细胞阳性率逐渐下降,与TGF-β1处理组相比差异有显著性意义(P<0.05).RT-PCR结果显示,空白对照组无α-SMA mRNA表达,5 ng/ml TGF-β1组与空白对照组相比,α-SMA mRNA表达明显上调(P<0.05),而TGF-β1+50 ng/ml BMP-7组、TGF-β1+100 ng/ml BMP-7组与TGF-β1组相比,α-SMAmRNA表达有下降趋势,但无显著性差异(P>0.05).结论 TGF-β