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目的 探讨雷公藤甲素(triptolide)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的大鼠系膜细胞增殖及凋亡的影响及机制.方法 实验分组:(1)正常对照组;(2)TGF-β1(1Oμg/L)组;(3)~(5)治疗组:不同质量浓度triptolide(0.4、2、10 μg/L)+ TGF-β1(10 μg/L)组.噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;原位末端标记法检测细胞凋亡;实时定量PCR法检测各组Ski、Smad3、Smad7 mRNA表达;Western印迹法检测各组Ⅰ型胶原、Ski、Smad3、Smad7蛋白表达;间接免疫荧光技术检测Ski、Smad3细胞内定位.结果 与对照组比较,triptolide可抑制TGF-β1诱导的系膜细胞增殖,差异有统计学意义(P<0.05),且呈浓度依赖性.triptolide组细胞凋亡率大于50%,较TGF-β1组显著提高(P<0.05).实时定量PCR及Westem印迹结果提示,与正常组比较,TGF-β1组Ski、Smad3、Smad7 mRNA及蛋白表达量均升高(P<0.05);与TGF-β1组比较,triptolide能够明显上调Ski、Smad7 mRNA及蛋白,下调Smad3 mRNA、蛋白及Ⅰ型胶原蛋白的表达,呈浓度依赖性(P<0.05).激光共聚焦荧光显微镜观察到triptolide组Smad3细胞质内荧光强度增强,细胞核内荧光强度减弱,而Ski均有增强.结论 triptolide可通过调节Ski、Smad7、Smad3 mRNA和蛋白的表达及Ski、Smad3的核转位,抑制TGF-β1诱导的肾小球系

作者:仲崇辉;陈晓岚;苏宝凤;王娜;范亚平

来源:中华肾脏病杂志 2012 年 28卷 11期

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作者:
仲崇辉;陈晓岚;苏宝凤;王娜;范亚平
来源:
中华肾脏病杂志 2012 年 28卷 11期
标签:
系膜细胞 雷公藤内酯 转化生长因子β1 细胞凋亡 Mesangial cells Triptolide Transforming growth factor beta1 Apoptosis
目的 探讨雷公藤甲素(triptolide)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的大鼠系膜细胞增殖及凋亡的影响及机制.方法 实验分组:(1)正常对照组;(2)TGF-β1(1Oμg/L)组;(3)~(5)治疗组:不同质量浓度triptolide(0.4、2、10 μg/L)+ TGF-β1(10 μg/L)组.噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;原位末端标记法检测细胞凋亡;实时定量PCR法检测各组Ski、Smad3、Smad7 mRNA表达;Western印迹法检测各组Ⅰ型胶原、Ski、Smad3、Smad7蛋白表达;间接免疫荧光技术检测Ski、Smad3细胞内定位.结果 与对照组比较,triptolide可抑制TGF-β1诱导的系膜细胞增殖,差异有统计学意义(P<0.05),且呈浓度依赖性.triptolide组细胞凋亡率大于50%,较TGF-β1组显著提高(P<0.05).实时定量PCR及Westem印迹结果提示,与正常组比较,TGF-β1组Ski、Smad3、Smad7 mRNA及蛋白表达量均升高(P<0.05);与TGF-β1组比较,triptolide能够明显上调Ski、Smad7 mRNA及蛋白,下调Smad3 mRNA、蛋白及Ⅰ型胶原蛋白的表达,呈浓度依赖性(P<0.05).激光共聚焦荧光显微镜观察到triptolide组Smad3细胞质内荧光强度增强,细胞核内荧光强度减弱,而Ski均有增强.结论 triptolide可通过调节Ski、Smad7、Smad3 mRNA和蛋白的表达及Ski、Smad3的核转位,抑制TGF-β1诱导的肾小球系