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目的 探讨前列腺素E2受体2亚型(EP2)激动剂(Butaprost)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的小鼠肾小球系膜细胞增殖、细胞周期、细胞外基质的影响及可能机制.方法 实验分组:(1)对照组;(2)TGF-β1(10 ng/ml)组;(3)~(5)Butaprost干预组:不同浓度Butaprost(10、1、0.1 μmol/L)+TGF-β1.CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术测定细胞周期;ELISA法检测细胞上清中环磷酸腺苷(cAMP)及前列腺激素E2(PGE2)的水平;实时定量PCR法检测细胞层黏连蛋白(LN)、纤连蛋白(FN)、结缔组织生长因子(CTGF)、环氧化酶1、2(COX1、COX2)、周期素激酶抑制剂p27Kip1 mRNA的表达.Western印迹法检测LN、FN、CTGF、COX2、p27Kip1蛋白及p38丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)活性变化.结果 与对照组相比,TGF-β1组系膜细胞增殖及G2+S期细胞比例明显增加;cAMP、PGE2表达增加;p27Kip1 mRNA及蛋白表达降低;FN、LN、CTGF、COX2 mRNA及蛋白表达升高;p38 MAPK活性增加(均P< 0.05).Butaprost干预后呈剂量依赖性抑制系膜细胞增殖,下调G2+S期细胞比例,上调cAMP及p27Kip1 mRNA及蛋白的表达,抑制FN、LN、CTGF、COX2 mRNA及蛋白表达及上清中PGE2的表达,抑制p38 MAPK活性(均P<0.05).结论 Butaprost可能通过增加cAMP的表达,抑制p38 MAPK活性,反馈抑制COX2及PGE2的表

作者:奚培培;徐玉音;黄新忠;陈晓岚;范亚平;李娜娜;潘天昳;徐小林

来源:中华肾脏病杂志 2013 年 29卷 10期

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作者:
奚培培;徐玉音;黄新忠;陈晓岚;范亚平;李娜娜;潘天昳;徐小林
来源:
中华肾脏病杂志 2013 年 29卷 10期
标签:
系膜细胞 转化生长因子β1 p38 MAPK EP2受体激动剂 cAMP Mesangial cell Transforming growth factor-beta-1 p38 mitogen activated protein kinase EP2 agonists cAMP
目的 探讨前列腺素E2受体2亚型(EP2)激动剂(Butaprost)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的小鼠肾小球系膜细胞增殖、细胞周期、细胞外基质的影响及可能机制.方法 实验分组:(1)对照组;(2)TGF-β1(10 ng/ml)组;(3)~(5)Butaprost干预组:不同浓度Butaprost(10、1、0.1 μmol/L)+TGF-β1.CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术测定细胞周期;ELISA法检测细胞上清中环磷酸腺苷(cAMP)及前列腺激素E2(PGE2)的水平;实时定量PCR法检测细胞层黏连蛋白(LN)、纤连蛋白(FN)、结缔组织生长因子(CTGF)、环氧化酶1、2(COX1、COX2)、周期素激酶抑制剂p27Kip1 mRNA的表达.Western印迹法检测LN、FN、CTGF、COX2、p27Kip1蛋白及p38丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)活性变化.结果 与对照组相比,TGF-β1组系膜细胞增殖及G2+S期细胞比例明显增加;cAMP、PGE2表达增加;p27Kip1 mRNA及蛋白表达降低;FN、LN、CTGF、COX2 mRNA及蛋白表达升高;p38 MAPK活性增加(均P< 0.05).Butaprost干预后呈剂量依赖性抑制系膜细胞增殖,下调G2+S期细胞比例,上调cAMP及p27Kip1 mRNA及蛋白的表达,抑制FN、LN、CTGF、COX2 mRNA及蛋白表达及上清中PGE2的表达,抑制p38 MAPK活性(均P<0.05).结论 Butaprost可能通过增加cAMP的表达,抑制p38 MAPK活性,反馈抑制COX2及PGE2的表