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目的 观察微炎性反应状态下低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor,LDLr)途径在糖尿病肾病(DN)足细胞损伤中的作用.方法 选取8周龄雄性db/db小鼠及对照组db/m小鼠,分别按随机数字表法分为db/db、db/db+酪蛋白组和db/m、db/m+酪蛋白组,每组均为8只.参照本实验室已建立的方法制备糖尿病肾病微炎性反应模型,每周收集24 h尿液、检测24 h尿蛋白量,8周后处死,收集血清标本,留取肾组织,检测血清脂质谱的变化.透射电镜观察足细胞超微结构变化,激光共聚焦显微镜及Western印迹观察足细胞特异性标志蛋白WT-1、nephrin及间充质细胞表型标志物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况.油红O染色和胞内游离胆固醇定量测定法观察肾小球中脂质积聚情况,免疫组化及Western印迹观察LDLr、固醇调节元件结合蛋白2(sterol regulatory element binding protein-2,SREBP-2)及其裂解激活蛋白(SREBP cleavage-activating protein,SCAP)在肾脏的表达情况,并且通过激光共聚焦显微镜观察WT-1与LDLr在肾脏的共表达情况.分析LDLr与nephrin、α-SMA表达的相关性.结果 与db/db组相比,db/db+酪蛋白组小鼠的蛋白尿、足细胞结构损害及足细胞的丢失明显加重,足细胞α-SMA的蛋白表达量显著增加,肾小球内脂质积聚明显增多,肾脏LDLr、SR

作者:张洋;马坤岭;刘晶;吴娱;胡泽波;吕林莉;刘必成

来源:中华肾脏病杂志 2014 年 30卷 4期

知识库介绍

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作者:
张洋;马坤岭;刘晶;吴娱;胡泽波;吕林莉;刘必成
来源:
中华肾脏病杂志 2014 年 30卷 4期
标签:
炎症 足细胞 糖尿病肾病 受体,LDL Inflammation Podocytes Diabetic nephropathies Receptors,LDL
目的 观察微炎性反应状态下低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor,LDLr)途径在糖尿病肾病(DN)足细胞损伤中的作用.方法 选取8周龄雄性db/db小鼠及对照组db/m小鼠,分别按随机数字表法分为db/db、db/db+酪蛋白组和db/m、db/m+酪蛋白组,每组均为8只.参照本实验室已建立的方法制备糖尿病肾病微炎性反应模型,每周收集24 h尿液、检测24 h尿蛋白量,8周后处死,收集血清标本,留取肾组织,检测血清脂质谱的变化.透射电镜观察足细胞超微结构变化,激光共聚焦显微镜及Western印迹观察足细胞特异性标志蛋白WT-1、nephrin及间充质细胞表型标志物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况.油红O染色和胞内游离胆固醇定量测定法观察肾小球中脂质积聚情况,免疫组化及Western印迹观察LDLr、固醇调节元件结合蛋白2(sterol regulatory element binding protein-2,SREBP-2)及其裂解激活蛋白(SREBP cleavage-activating protein,SCAP)在肾脏的表达情况,并且通过激光共聚焦显微镜观察WT-1与LDLr在肾脏的共表达情况.分析LDLr与nephrin、α-SMA表达的相关性.结果 与db/db组相比,db/db+酪蛋白组小鼠的蛋白尿、足细胞结构损害及足细胞的丢失明显加重,足细胞α-SMA的蛋白表达量显著增加,肾小球内脂质积聚明显增多,肾脏LDLr、SR