目的 观察糖尿病小鼠中肾脏固有细胞(足细胞、近端肾小管上皮细胞)的泛素化修饰和内质网应激的情况.方法 建立链脲菌素小鼠糖尿病模型,成模16周后取肾组织,免疫荧光法检测泛素化蛋白和内质网应激蛋白葡萄糖调节蛋白94 (GRP94)在肾脏不同区段的表达和分布.流式细胞术分离培养原代小鼠足细胞和近曲小管上皮细胞,高糖(30 mmol/L)刺激不同时间(1d、3d、7d),Western印迹检测蛋白泛素化蛋白和GRP94蛋白的表达.结果 糖尿病小鼠出现微量蛋白尿和轻度系膜区增宽,泛素化蛋白在肾小球主要分布于足细胞,并散在分布于肾小管上皮(近端、远端)的胞质和胞核,糖尿病组肾小球和近端肾小管的泛素化蛋白表达均高于对照组(均P＜ 0.05).高糖刺激后,原代足细胞和近曲小管上皮细胞泛素化蛋白均呈时间依赖方式升高,刺激3d、7d高糖组均高于正常糖组(均P＜0.05).GRP94散布在肾小球和肾小管,糖尿病组肾小球GRP94表达均高于对照组(P＜0.05),但近端肾小管GRP94表达与对照组差异无统计学意义.足细胞GRP94表达在高糖刺激后随时间延长而升高,3d、7d时高糖组与正常糖组差异均有统计学意义(均P＜0.05);近曲小管上皮细胞在高糖刺激后GRP94未发生明显变化,与正常糖组比较差异无统计学意义.结论 高糖可诱导肾组织蛋白泛素化水平增加.而足细胞内
作者：王奕蔓；梁伟；丁国华；陈铖
来源：中华肾脏病杂志 2017 年 33卷 4期
