目的 通过膜性肾病经典的动物模型被动Heymann肾炎(PHN),探讨足细胞自噬在膜性肾病病变过程中的作用,以及自噬激活可能的细胞内机制.方法 SPF级健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为5组即对照组、PHN 2 d组、PHN 4 d组、PHN 7 d组、PHN 21 d组,建立大鼠PHN模型.采用透射电镜观察足细胞形态和自噬泡,Weibel-Gomez点计数法计数单个肾小球足细胞数量,免疫组织化学染色检测肾小球内膜攻击复合物C5b-9的沉积与半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3的表达,原位缺口末端标记(TUNEL)法检测肾小球内细胞凋亡,Western印迹法检测肾小球自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)、葡萄糖调节蛋白(GRP)78、磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(phosphorylated protein kinase R-like ER kinase,p-PERK)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(phosphorylated c-jun aminoterminal kinase,p-JNK)、活化转录因子6α(activating transcription factor 6α,ATF6α)的表达.结果 (1)造模后第4天起即可在肾小球内观察到C5b-9沿基底膜呈线状沉积.同时,透射电镜下可见上皮下少许颗粒状电子致密物沉积及足突融合,病变随时间呈加重趋势,至第21天可见典型膜性肾病改变.此外,尿蛋白定量结果显示,造模第3天起尿蛋

作者：杨凤杰；周建华；吕倩影；蒲金赟；张瑜

来源：中华肾脏病杂志 2014 年 30卷 1期