目的 以嘌呤霉素(PAN)损伤足细胞,以地塞米松(DEX)干预,观察不同时间点瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)表达和分布的变化,探讨在足细胞损伤过程中,DEX对TRPC6表达与分布的影响及与足细胞损伤的关系.方法 体外培养足细胞,设立对照组、PAN刺激组和DEX干预组.对照组用含0.02％二甲亚砜(DMSO)的RPMI 1640培养液培养,PAN刺激组加入PAN(50 μg/ml),DEX干预组同时加入PAN(50 μg/ml)和溶解于0.02％ DMSO的DEX(1 μmol/L),处理8h、24 h、48 h后观察细胞形态并拍摄,采用图像处理软件分析各组细胞形态及胞体面积的差别.采用流式细胞仪检测足细胞凋亡率,采用实时荧光定量PCR、Western印迹和间接免疫荧光染色检测各时间点TRPC6的mRNA、蛋白表达及分布变化.结果 经PAN刺激后细胞体显著缩小(P＜0.05),足突回缩、消失,细胞间失去相互连接,刺激后48 h足细胞凋亡率显著升高(P＜0.05).PAN刺激组在刺激24 h和48 h后TRPC6 mRNA及蛋白表达量显著上升(P＜0.05),TRPC6在足细胞上的分布亦出现异常.DEX干预后细胞胞体显著大于PAN刺激组(P＜0.05),可维持正常的足突形态;干预48 h后足细胞凋亡率显著低于PAN刺激组,TRPC6 mRNA及蛋白的表达、分布均趋于正常水平.结论 DEX通过稳定重要的足细胞分子TRPC6的表达及分布来抑制足细胞损
作者：王辉阳；于力；于生友；郝志宏；张瑶
来源：中华肾脏病杂志 2014 年 30卷 5期
