目的 观察支架蛋白JLP基因缺失对单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾间质纤维化的影响,探讨JLP在梗阻性肾病肾纤维化形成中的作用和可能机制.方法 将jlp野生型(jlp+/+)小鼠和jlp敲除(jlp-/-)小鼠分为4组:jlp+/+假手术组(jlp+/+-Sham);jlp-/-假手术组(jlp-/-Sham);jlp+/+模型组(jlp+/+-UUO)和jlp-/-模型组(jlp-/--UUO).分别于术后7d和14 d处死小鼠.Masson染色观察肾间质纤维化改变;免疫荧光、免疫组化及Western印迹法观察JLP在各组小鼠肾组织的表达与分布;免疫组化法检测肾组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原纤维(COL-Ⅰ)、Ⅲ型胶原纤维(COL-Ⅲ)、转化生长因子β1(TGF-β1)表达;Western印迹检测肾组织α-SMA、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、TGF-β1、p-Smad2及p-Smad3蛋白表达.结果 jlp+/+小鼠肾组织表达JLP,主要分布于肾小管.Masson染色结果显示,与jlp+/+-UUO组比较,jlp-/--UUO组肾间质胶原纤维增加,纤维化程度加重(均P< 0.05).免疫组化结果显示,与jlp+/+-UUO组比较,jlp-/--UUO组小鼠肾皮质α-SMA、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ和TGF-β1表达明显升高(均P<0.05).Western印迹结果显示,与jlp+/+-UUO组比较,jlp-/--UUO组α-SMA、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ和TGF-β1蛋白表达明显升高(均P< 0.05),p-Smad2和p-Smad3蛋白表达也明显升高(均P<0.05).
作者:付强;王惠明;颜奇;陈朝威;张勤;丁国华
来源:中华肾脏病杂志 2016 年 32卷 1期