目的 探讨高糖培养的人肾小管上皮细胞(HK-2)微RNA-503(miR-503)的表达变化,对其靶基因Bcl-2表达、caspase酶活性和细胞凋亡的影响,探讨高糖诱导肾小管损伤的发病机制.方法 将体外培养HK-2细胞分为正常糖组、甘露醇高渗对照组、高糖组,在倒置显微镜下观察细胞形态;采用AnnexinV-FITC双染流式细胞仪检测HK-2细胞的凋亡率;实时定量PCR法检测miR-503表达;Western印迹检测HK-2细胞抗凋亡蛋白Bcl-2、活化的caspase-9(cleaved caspase-9)的表达.结果 培养48 h后,与正常糖组相比,高糖组、高渗组HK-2细胞凋亡率增加(P＜0.05),HK-2细胞内miR-503表达上调(P＜0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少(P＜0.05),线粒体凋亡通路相关蛋白cleaved caspase-9蛋白表达增加(P＜0.05),差异均有统计学意义.结论 高糖培养的HK-2细胞内miR-503的表达明显上调,抑制其靶蛋白Bcl-2的表达,活化线粒体凋亡途径,激活caspase酶,诱导HK-2细胞凋亡.高糖的肾小管毒性一部分是渗透压的作用.miR-503可能参与了糖尿病肾病病理损伤的发生,有望成为糖尿病肾病新的治疗靶点.
作者：曹旭；刘佳；范秋灵；汪旭；徐莉；赵雪；王力宁
来源：中华肾脏病杂志 2017 年 33卷 6期
