目的 探讨动力相关蛋白-1(DRP-1)对糖皮质激素诱导的胰岛β细胞凋亡的影响.方法 采用地塞米松(Dex)处理大鼠胰岛β细胞系INS-1细胞,通过亚G1(Sub-G1)法检测细胞凋亡,Western blotting检测DRP-1的表达.利用四环素诱导表达系统在INS-1细胞构建可诱导表达野生型DRP-1 (DRP-1 wt)基因和突变型DRP-1(DRP-1 k38A)基因的稳转细胞系,并用细胞免疫荧光和Western blotting验证强力霉素(Dox)对转染基因的可诱导性.采用TUNEL法分析在Dex处理情况下,DRP-1 wt基因或DRP-1 k38A基因表达对Dex诱导的胰岛β细胞凋亡的影响,并同时测定相应细胞凋亡蛋白酶Caspase-3活性及细胞内活性氧(ROS)的变化情况.多组间均数比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用t检验.结果 不同浓度Dex处理组细胞凋亡率[(15.7±4.2)％、(30.4±3.3)％、(61.6±5.4)％]明显高于未处理组[(3.3±1.3)％,t=6.44、14.07、30.26,均P＜0.05]；200 nmol/L Dex处理24、48及96 h后细胞凋亡率[(10.6±1.2)％、(15.1±4.6)％、(42.6±9.8)％]明显高于处理0h组[(2.4±1.3)％,t=2.99、4.63、14.66,均P＜0.05].Western blotting显示Dex可诱导胰岛β细胞DRP-1基因的表达.DRP-1 wt基因表达能够显著促进Dex诱导的β细胞凋亡[(53.8±7.2)％比(16.2±3.2)％,t=10.02,P＜0

作者：彭亮；房青；刘虹麟；许世清；门秀丽；娄晋宁；张文健

来源：中华糖尿病杂志 2013 年 5卷 6期