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目的 观察1,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)2D3]对高糖状态下人近端肾小管上皮细胞(HK-2)维生素D受体(VDR)以及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)表达的影响.方法 体外培养HK-2细胞,实验分为对照组(糖浓度5.5 mmol/L)、甘露醇组(19.5 mmol/L)、高糖组(糖浓度25.0 mmol/L)、高糖+1,25-(OH)2 D3组(浓度1.0×10-6、1.0×10-7、1.0 × 10-8 mol/L)和高糖+1,25-(OH)2D3+siRNA VDR干扰组,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测VDR mRNA表达,Western blotting检测VDR蛋白表达,双荧光素酶报告基因系统检测VDR基因转录活性,放射免疫法检测AngⅡ含量.多个样本间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用q检验.结果 与对照组相比,高糖组HK-2细胞中VDR mRNA、蛋白的表达及基因转录活性均明显降低(分别为1.34±0.22比2.47±0.31、0.51 ±0.06比1.14 ±0.13、0.51±0.21比1.42±0.28,均P<0.05).1,25-(OH)2D3上调高糖条件下HK-2细胞中VDR mRNA、蛋白的表达及基因转录活性,且呈浓度依赖性(分别为1.96±0.31比1.34 ± 0.22、0.93±0.08比0.51±0.06、1.12 ±0.23比0.51±0.21,均P<0.05).与对照组相比,高糖使HK-2细胞分泌AngⅡ增加[(88±10)比(17±2) ng/L,P<0.05].1,25-(OH)2D3浓度依赖性下调高糖诱导的AngⅡ高表达[(44±5)比(88±10) ng/L,

作者:高苹;刘颖;林梅;陈艳梅;水华;姚涛;吴小燕

来源:中华糖尿病杂志 2013 年 5卷 8期

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作者:
高苹;刘颖;林梅;陈艳梅;水华;姚涛;吴小燕
来源:
中华糖尿病杂志 2013 年 5卷 8期
标签:
活性维生素D3 高糖 肾小管上皮细胞 受体 血管紧张素Ⅱ Active vitamin D3 High glucose Tubular epithelial cells Receptor Angiotensin Ⅱ
目的 观察1,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)2D3]对高糖状态下人近端肾小管上皮细胞(HK-2)维生素D受体(VDR)以及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)表达的影响.方法 体外培养HK-2细胞,实验分为对照组(糖浓度5.5 mmol/L)、甘露醇组(19.5 mmol/L)、高糖组(糖浓度25.0 mmol/L)、高糖+1,25-(OH)2 D3组(浓度1.0×10-6、1.0×10-7、1.0 × 10-8 mol/L)和高糖+1,25-(OH)2D3+siRNA VDR干扰组,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测VDR mRNA表达,Western blotting检测VDR蛋白表达,双荧光素酶报告基因系统检测VDR基因转录活性,放射免疫法检测AngⅡ含量.多个样本间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用q检验.结果 与对照组相比,高糖组HK-2细胞中VDR mRNA、蛋白的表达及基因转录活性均明显降低(分别为1.34±0.22比2.47±0.31、0.51 ±0.06比1.14 ±0.13、0.51±0.21比1.42±0.28,均P<0.05).1,25-(OH)2D3上调高糖条件下HK-2细胞中VDR mRNA、蛋白的表达及基因转录活性,且呈浓度依赖性(分别为1.96±0.31比1.34 ± 0.22、0.93±0.08比0.51±0.06、1.12 ±0.23比0.51±0.21,均P<0.05).与对照组相比,高糖使HK-2细胞分泌AngⅡ增加[(88±10)比(17±2) ng/L,P<0.05].1,25-(OH)2D3浓度依赖性下调高糖诱导的AngⅡ高表达[(44±5)比(88±10) ng/L,