目的 研究核糖体蛋白S6激酶1 (S6K1)基因沉默对肝脏炎性因子表达的影响,探讨S6K1在肝脏胰岛素抵抗中的作用机制.方法 将48只体重12.6～14.8 g的6周龄雄性C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为4组:普食对照组[普通饲料(ND)+含U6启动子空载体腺病毒组(pU6Ax组),即ND+ pU6Ax组]、普食实验组[ND+ S6K1短发夹RNA (shRNA)重组基因腺病毒组,即ND+S6K1Ax组]、高脂对照组[高脂饲料(HFD)+pU6Ax组,即HFD+ pU6Ax组]、高脂实验组(HFD+S6K1Ax组),分别喂养16周.实验组和对照组尾静脉分别注射S6K1Ax、pU6Ax(均为普食实验组及对照组90 ml,高脂实验组及对照组120 ml,效价为2.0×1010 pfu/ml).注射后第6天过夜饥饿后,4组各随机抽取6只行葡萄糖耐量实验,剩余的小鼠处死取肝脏,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝脏炎性因子单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10 mRNA的表达,Western blotting观察肝脏蛋白S6K1、S6K1苏氨酸389(S6K1-thr389)、胰岛素受体底物1(IRS1)丝氨酸1101 (IRS1-ser1101)、IRS1丝氨酸636/639(IRS1-ser636/639)、蛋白激酶B丝氨酸473(A kt-ser473)、c-Jun氨基末端激苏氨酸183/酪氨酸185(JNK-thr183/tyr185)表达.两组比较采用t检验,多组问比较采用单因素方差分析.

作者：李树颖；李晶；于德民；常柏；姚智

来源：中华糖尿病杂志 2013 年 5卷 10期