目的:观察长链非编码RNA(lncRNA)尿路上皮癌相关基因1(UCA-1)对人肾上皮293T细胞的磷脂酰肌醇3激酶-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(PI3K-Akt)信号通路及糖代谢的影响,并探索其中可能的分子机制。方法将293T细胞分为5组,即空白对照组、空质粒的阴性对照组、无义乱序RNA的阴性对照组(si-scr组)、过表达UCA-1组(UCA-1组)及沉默UCA-1组(si-UCA-1组)。通过转染UCA-1过表达质粒或UCA-1特异性小干扰RNA(siRNA)来干预293T细胞中的UCA-1水平。Western blotting法检测PI3K-Akt信号通路关键蛋白的表达变化,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和荧光素酶报告系统检测UCA-1对第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)的RNA水平和转录活性的影响,并通过2-脱氧-3H-D-葡萄糖掺入法检测细胞的葡萄糖摄取能力。两组之间比较用t检验,多组之间比较采用单因素方差分析。结果(1)与对照组比较,UCA-1组PTEN的mRNA水平明显下降(1.07±0.05比0.24±0.05,t=14.257,P<0.01),而转染UCA-1特异性siRNA细胞中PTEN的mRNA水平明显上升(si-scr组比si-UCA-1组,1.02±0.03比12.47±0.17, t=15.816, P<0.01)。(2)阴性对照组与UCA-1组比较,转染UCA-1过表达质粒PTEN的启动子转录活性降低:1.07±0.05比0.23±0.0
作者:田晓玲;李慧琼;徐焱成;林凤平;朱四民
来源:中华糖尿病杂志 2016 年 8卷 9期