目的 探讨一种简单快捷、廉价高效的小鼠胰岛分离与纯化方法.方法 采用自制的穿刺针由胆总管逆行穿刺并灌注胶原酶Ⅴ消化胰腺,使用仅一种密度梯度介质离心结合手工挑选的方法分离纯化6~8周龄雄性ICR小鼠胰岛.同时,以单纯手工挑选法纯化胰岛作为对照组.双硫腙染色鉴定获取胰岛纯度,吖啶橙/碘化丙啶染色鉴定胰岛活力.采用不同浓度葡萄糖(低糖2.8 mmol/L,高糖20.0 mmol/L)刺激的胰岛素释放实验检测胰岛功能.采用t检验比较两组间的差异.结果 采用自制穿刺针及密度梯度离心的新方法提取5只小鼠胰岛整体耗时152 min,而单纯手工挑选法则耗时347 min;新方法每只小鼠平均可得胰岛(95±8)个,略低于单纯手工挑选组的(124±10)个(t=4.027,P=0.016);但新方法所得胰岛纯度为92.6
作者:李伟;徐伟;陈娟;王晓航;孙子林
来源:中华糖尿病杂志 2017 年 9卷 9期