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目的 探讨缓激肽B2受体(bradykinin B2 receptor,B2R)对人绒毛外滋养细胞增殖和功能的影响及其可能机制. 方法 人绒毛外滋养细胞(HTR-8/SVneo细胞)分为4组:空载体质粒组转染pcDNA-3.1质粒;B2R表达质粒组转染pcDNA3.1-B2R质粒;小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)阴性对照组转染siRNA阴性对照序列;B2R特异性siRNA组转染B2R特异性siRNA序列.采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应技术和蛋白质印迹技术检测转染后细胞中B2R以及基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9、细胞周期蛋白-1和血管内皮生长因子-A mRNA及蛋白的表达变化.采用细胞计数试剂盒-8及流式细胞术检测细胞活性以及细胞周期;细胞迁移实验和侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力;细胞成环实验检测细胞成血管能力.采用t检验进行统计学分析. 结果 (1)与空载体质粒组相比,B2R表达质粒组细胞中B2R mRNA(5.06±0.49与1.00±0.28,t=7.226,P=0.002)及蛋白表达水平升高(1.34±0.07与1.00±0.05,t=3.727,P=0.006);与siRNA阴性对照组相比,B2R特异性siRNA组细胞中B2R mRNA(0.34±0.05与1.00±0.17,t=3.667,P=0.021)及蛋白表达水平降低(0.74±0.03与1.00±0.05,t=4.097,P=0.006).(2)与空载体质粒组相比,B2R表达质粒组细胞增殖活性升高(1.50±0.03与1.34±0.04),

作者:彭艳芳;郑明明;赵光锋;刘丹;丁海林;王志尹;雷祎;胡娅莉

来源:中华围产医学杂志 2018 年 21卷 10期

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作者:
彭艳芳;郑明明;赵光锋;刘丹;丁海林;王志尹;雷祎;胡娅莉
来源:
中华围产医学杂志 2018 年 21卷 10期
标签:
受体,缓激肽B2 滋养层 细胞系 细胞增殖 Receptor,bradykinin B2 Trophoblasts Cell line Cell proliferation
目的 探讨缓激肽B2受体(bradykinin B2 receptor,B2R)对人绒毛外滋养细胞增殖和功能的影响及其可能机制. 方法 人绒毛外滋养细胞(HTR-8/SVneo细胞)分为4组:空载体质粒组转染pcDNA-3.1质粒;B2R表达质粒组转染pcDNA3.1-B2R质粒;小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)阴性对照组转染siRNA阴性对照序列;B2R特异性siRNA组转染B2R特异性siRNA序列.采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应技术和蛋白质印迹技术检测转染后细胞中B2R以及基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9、细胞周期蛋白-1和血管内皮生长因子-A mRNA及蛋白的表达变化.采用细胞计数试剂盒-8及流式细胞术检测细胞活性以及细胞周期;细胞迁移实验和侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力;细胞成环实验检测细胞成血管能力.采用t检验进行统计学分析. 结果 (1)与空载体质粒组相比,B2R表达质粒组细胞中B2R mRNA(5.06±0.49与1.00±0.28,t=7.226,P=0.002)及蛋白表达水平升高(1.34±0.07与1.00±0.05,t=3.727,P=0.006);与siRNA阴性对照组相比,B2R特异性siRNA组细胞中B2R mRNA(0.34±0.05与1.00±0.17,t=3.667,P=0.021)及蛋白表达水平降低(0.74±0.03与1.00±0.05,t=4.097,P=0.006).(2)与空载体质粒组相比,B2R表达质粒组细胞增殖活性升高(1.50±0.03与1.34±0.04),