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目的了解结缔组织生长因子(CTGF)是否诱导肾小球系膜细胞产生趋化因子RANTES,了解脂氧素A4(LXA4)是否影响CTGF对合成RANTES的诱导作用,并探讨其作用机制.方法应用CTGF刺激培养的大鼠肾小球系膜细胞,应用RT-PCR方法测定RANTES的mRNA表达,应用ELISA测定上清液中RANTES.应用趋化试验测定上清液对单核细胞(THP-1)的趋化作用.应用Western blot测定分裂原激活的蛋白激酶(p42/44 MAPK)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K)和蛋白激酶B(PKB)的表达.应用凝胶电泳迁移率试验测定核因子-κB(NF-κB)的表达.构建含脂氧素A4受体同源基因(LRHG)的真核表达载体pcDNA3.1/LRHG,并转染系膜细胞,观察LXA4对CTGF作用的调节是否依赖LRHG.结果 CTGF刺激使系膜细胞RANTES的mRNA表达与分泌量增加,增加磷酸化(P)-p42/44 MAPK、P-PI3-K、P-PKB及NF-κB表达.LXA4呈剂量依赖性地抑制CTGF所致的上述变化.P-p42/44 MAPK抑制剂PD98059抑制CTGF诱导的p42/44 MAPK磷酸化与RANTES分泌.PI3-K抑制剂LY294002抑制CTGF诱导的PI3-K、PKB、NF-κB活化与RANTES分泌.NF-κB抑制剂PDTC抑制CTGF诱导的NF-κB活化与RANTES分泌.pcDNA3.1/LRHG转染使LXA4对CTGF诱导的p42/44 MAPK磷酸化与RANTES的分泌的抑制作用增强.结论 LXA4可抑制CTGF引起的系膜细胞分泌RANTES,其

作者:吴升华;陆超;董玲;周国平;姜新猷

来源:中华微生物学和免疫学杂志 2005 年 25卷 11期

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作者:
吴升华;陆超;董玲;周国平;姜新猷
来源:
中华微生物学和免疫学杂志 2005 年 25卷 11期
标签:
脂氧素A4 结缔组织生长因子 RANTES 系膜细胞 NF-κB
目的了解结缔组织生长因子(CTGF)是否诱导肾小球系膜细胞产生趋化因子RANTES,了解脂氧素A4(LXA4)是否影响CTGF对合成RANTES的诱导作用,并探讨其作用机制.方法应用CTGF刺激培养的大鼠肾小球系膜细胞,应用RT-PCR方法测定RANTES的mRNA表达,应用ELISA测定上清液中RANTES.应用趋化试验测定上清液对单核细胞(THP-1)的趋化作用.应用Western blot测定分裂原激活的蛋白激酶(p42/44 MAPK)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K)和蛋白激酶B(PKB)的表达.应用凝胶电泳迁移率试验测定核因子-κB(NF-κB)的表达.构建含脂氧素A4受体同源基因(LRHG)的真核表达载体pcDNA3.1/LRHG,并转染系膜细胞,观察LXA4对CTGF作用的调节是否依赖LRHG.结果 CTGF刺激使系膜细胞RANTES的mRNA表达与分泌量增加,增加磷酸化(P)-p42/44 MAPK、P-PI3-K、P-PKB及NF-κB表达.LXA4呈剂量依赖性地抑制CTGF所致的上述变化.P-p42/44 MAPK抑制剂PD98059抑制CTGF诱导的p42/44 MAPK磷酸化与RANTES分泌.PI3-K抑制剂LY294002抑制CTGF诱导的PI3-K、PKB、NF-κB活化与RANTES分泌.NF-κB抑制剂PDTC抑制CTGF诱导的NF-κB活化与RANTES分泌.pcDNA3.1/LRHG转染使LXA4对CTGF诱导的p42/44 MAPK磷酸化与RANTES的分泌的抑制作用增强.结论 LXA4可抑制CTGF引起的系膜细胞分泌RANTES,其