目的 采用RNA干扰手段抑制营养缺乏自噬因子1(NAF1)在肝细胞癌MHCC-97H细胞中的表达,观察其对肝癌细胞侵袭转移能力的影响.方法 采用NAF1-siRNA和空白对照NC-siRNA转染肝细胞癌MHCC-97H细胞,设为NAF组和NC组,同时设立未转染空白对照组(Blank组).荧光实时定量PCR法检测MHCC-97H细胞NAF1mRNA表达.Western blotting法检测MHCC-97H细胞NAF蛋白和基质金属蛋白酶9(MMP9)蛋白表达.细胞划痕实验检测MHCC-97H细胞迁移能力.Transwell实验检测MHCC-97H细胞侵袭能力.荧光素酶报告基因实验检测MHCC-97H细胞核因子κB (NF-KB)信号通路的相对活性.多组间数据的比较用单因素方差分析,两组之间数据的比较采用f检验.结果 NAF组MHCC-97H细胞NAF 1-mRNA的相对表达量为(6.50±0.23)%,低于Blank组的(100.80±0.60)%,且差异具有统计学意义(t=14.17,P=0.02).NAF组MHCC-97H细胞NAF1蛋白和MMP9蛋白的相对表达量分别为0.12±0.01、0.07±0.01,均低于Blank组的0.79±0.05、0.81±0.02,且差异均有统计学意义(t=5.21、7.45,P=0.00、0.02).NAF组MHCC-97H细胞的迁移距离明显小于Blank组.NAF组穿膜细胞的数量为(11.28±1.56)个/视野,少于Blank组的(197.87±3.18)个/视野,且差异有统计学意义(t=7.97,P=0.00),NAF组NF-κB信号通路的相对活
作者:许赤;蔡惠宁;李翠平;陈文捷
来源:中华细胞与干细胞杂志(电子版) 2016 年 6卷 2期