目的:观察慢病毒介导的亲环素A(cyclophilin A,CyPA)小干扰RNA对载脂蛋白E基因敲除( ApoE-/-)小鼠动脉粥样斑块的影响。方法采用ApoE-/-小鼠颈动脉硅胶圈置入法快速建立动脉粥样斑块模型,然后将小鼠分为CyPA小干扰RNA慢病毒载体治疗组( CyPA-RNAi-LV组)和绿色荧光蛋白-慢病毒载体对照组(NC-GFP-LV组),采用局部注射法将10μl(1.0×108 TU/ml)慢病毒载体局部作用硅胶圈置入处10 min,干预ApoE-/-小鼠颈动脉斑块。采用苏木素-伊红染色法观察各组小鼠动脉粥样斑块大小。采用实时聚合酶链反应( RT-PCR)法检测各组小鼠动脉粥样硬化斑块中CyPA mRNA的表达水平,Western blot法检测其蛋白水平。结果转染6周后,CyPA-RNAi-LV组小鼠动脉粥样硬化斑块进展慢于NC-GFP-LV组,斑块面积分别为(9085±671)μm2和(18021±1901)μm2,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),斑块中脂质含量较NC-GFP-LV组少[(17.8±4.5)%比(28.9±6.3)%, P<0.05],胶原含量较NC-GFP-LV组多[(35.1±5.2)%比(24.2±4.8)%, P<0.05],内膜/中膜比值NC-GFP-LV组较高(0.65±0.12比0.36±0.11,P<0.05),管腔狭窄较NC-GFP-LV组轻(内膜/管腔比值,0.18±0.02比0.33±0.03, P<0.05)。 CyPA-RNAi-LV组小鼠
作者:严金川;李瑛;王翠平;袁伟;王中群
来源:中华心血管病杂志 2014 年 7期