目的 建立过氧化氢(H2O2)诱导的人肺动脉内皮细胞(PAEC)损伤模型,探讨氧化应激促使PAEC结构和功能改变的分子机制.方法 采用不同浓度(25、50、100、200、400、800、1 600、3 200和6 400 μmol/L)的H2O2刺激PAEC,分别作用4、24 h后,采用CCK-8法测定PAEC活力并绘制存活曲线,采用流式细胞术检测PAEC凋亡情况,利用小分子荧光探针检测PAEC内活性氧(ROS)生成和线粒体活性,采用Western blot法检测PAEC内信号分子的磷酸化水平.结果 (1)不同浓度H2O2对PAEC活力的影响:H2O2作用4h后,PAEC的活力随着H2O2浓度的增加而降低.同时,经过计算H2O2作用4和24h后,H2O2抑制PAEC活力的IC50值分别为397.00和488.77 μmol/L.(2)H2O2对PAEC凋亡的影响:400 μmol/L的H2O2作用4h后,PAEC晚期凋亡和坏死的比率分别为(22.58 ±3.69)％和(11.86±4.27)％,而阴性对照PAEC晚期凋亡和坏死的比率仅为(3.41±1.44)％和(1.94±1.15)％,P均＜0.05.H2O2处理后PAEC存活率仅为(7.98±3.21)％,明显低于阴性对照(48.89±8.08)％,P＜0.01.但H2O2处理后PAEC与阴性对照PAEC的早期凋亡率差异并无统计学意义.(3)H2O2对PAEC内线粒体活性和ROS生成的影响:H2O2处理后PAEC ROS生成量和线粒体活性均明显高于阴性对照(P均＜0.01).(4) H2O2对PAEC内信号传递分子蛋

作者：叶珏；何阳阳；颜艺；赵隽涵；连天宇；王晓建；阎雨；张思瑾；杨淑慧；荆志成

来源：中华心血管病杂志 2017 年 45卷 7期