目的 探讨血小板衍生生长因子(PDGF)?BB是否通过去乙酰化酶沉默信息调节因子3 (SIRT3)影响糖酵解途径进而调控肺动脉平滑肌细胞(PASMC)的表型转化.方法 采用组织贴块法培养大鼠原代PASMC.分组实验中以PDGF?BB作为刺激因子,以2?脱氧葡萄糖(2?DG)作为糖酵解途径抑制剂,将PASMC分为空白对照组、PDGF?BB(30 ng/ml)组、PDGF?BB(30 ng/ml)+2?DG(10 mmol/L)组;在慢病毒过表达实验中,将PASMC分为空白对照组、PDGF?BB(30 ng/ml)组,PDGF?BB(30 ng/ml)+SIRT3过表达组,PDGF?BB(30 ng/ml)+空载体组.分别采用实时定量PCR(RT?qPCR)及Western blot法检测PASMC中α?平滑肌肌动蛋白(α?SMA)、平滑肌肌球蛋白重链(SM?MHC)、钙调蛋白(calponin)、波形蛋白(vimentin)等表型指标的表达.同时采用细胞免疫荧光染色检测α?SMA表达水平.采用5?乙炔基?2′?脱氧尿苷(EDU)检测PASMC增殖情况.采用Western blot法检测PDGF?BB刺激后SIRT3的蛋白表达.在慢病毒过表达实验中,分别采用RT?qPCR、Western blot法检测葡萄糖转运蛋白1 (Glut1)及有氧糖酵解酶mRNA和蛋白的表达水平.结果(1)PDGF?BB通过糖酵解途径影响PASMC表型转化:PDGF?BB组细胞收缩表型指标SM?MHC、calponin、α?SMA的mRNA和蛋白表达水平均低于空白对照组(P均<0.05),合成表型指标v

作者：卢毅；陈蕊；马金玉；王伦平；仇苓苓；王翠平；严金川；刘培晶

来源：中华心血管病杂志 2019 年 47卷 12期