目的 探讨sonic hedgehog (SHH)信号通路在血小板源性生长因子(PDGF)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖中的作用.方法 体外培养人大隐静脉VSMC,施加PDGF刺激后应用激光共聚焦显微成像及蛋白印迹(Western blot)检测SHH信号通路分子mRNA的表达变化;分别应用慢病毒介导的RNAi技术及SHH信号通路特异抑制剂cyclopamine阻断SHH通路后,用BrdU掺入法联合Ki-67染色评价细胞增殖情况.结果 激光共聚焦显微成像发现与对照组相比,PDGF刺激能够显著诱导VSMC中SHH信号通路蛋白shh,Patched1及Gli2的表达;同时,蛋白印迹也显示PDGF刺激能够明显增加SHH信号通路分子的表达;Gli2-siRNA慢病毒载体能够抑制Gli2的表达,Gli2-siRNA组BrdU掺入量为对照组的(49±0.6)%;与对照组相比,Gli2-siRNA组Ki-67阳性细胞数也明显减少;蛋白印迹显示SHH信号通路特异抑制剂cyclopamine能够抑制SHH信号通路下游转录因子Gli2的表达;cyclopamine组BrdU掺入量为对照组的(52±0.3)%,与对照组相比,cyclopamine组Ki-67阳性细胞数明显减少.结论 SHH信号通路在PDGF诱导的VSMC增殖中有重要作用.
作者:李凤贺;赵渝;王学虎;时德;傅麒宁;刘洪
来源:中华医学杂志 2013 年 93卷 19期