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目的为消除急性髓系白血病标志基因AML1/ETO的活性,确定核受体辅助抑制因子(nuclear receptor co-repressor,N-CoR)与ETO基因相互作用的活性部位.方法用PCR扩增不同区段的N-CoR(N-CoRY),克隆入酵母表达质粒pGADGL中,构建获得pGADGL/N-CoRY.应用酵母双杂交技术及X-gal染色确定pGADGL/N-CoRY 10个区段的N-CoR是否与ETO结合.结果 N-CoR的988~1126氨基酸残基与1551~1801氨基酸残基共存时,才能与ETO发生结合作用,是与ETO相互作用的结构域.结论 N-CoR两个结构域能与ETO的两个锌指结构作用,保持两种蛋白之间的稳定结合.

作者:王敏;郝长来;唐克晶;邢海燕;田征;张屹;王建祥

来源:中华血液学杂志 2002 年 23卷 12期

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作者:
王敏;郝长来;唐克晶;邢海燕;田征;张屹;王建祥
来源:
中华血液学杂志 2002 年 23卷 12期
标签:
白血病,髓系 核受体辅助抑制因子 基因,ETO
目的为消除急性髓系白血病标志基因AML1/ETO的活性,确定核受体辅助抑制因子(nuclear receptor co-repressor,N-CoR)与ETO基因相互作用的活性部位.方法用PCR扩增不同区段的N-CoR(N-CoRY),克隆入酵母表达质粒pGADGL中,构建获得pGADGL/N-CoRY.应用酵母双杂交技术及X-gal染色确定pGADGL/N-CoRY 10个区段的N-CoR是否与ETO结合.结果 N-CoR的988~1126氨基酸残基与1551~1801氨基酸残基共存时,才能与ETO发生结合作用,是与ETO相互作用的结构域.结论 N-CoR两个结构域能与ETO的两个锌指结构作用,保持两种蛋白之间的稳定结合.