目的 探讨SHP-1基因表达与启动子甲基化状态在慢性髓性白血病(CML)疾病进展中的作用及其机制.方法 SYBR Green荧光定量PCR及Western blot方法检测94例CML患者骨髓或外周血单个核细胞中SHP-1基因的表达;甲基化特异性PCR(MSP)方法检测SHP-1基因启动子区CpG岛的甲基化状态;慢病毒表达载体感染K562细胞使SHP-1基因过表达,CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞的凋亡率及细胞周期分布;荧光探针定量PCR检测BCR-ABL mRNA水平,Western blot方法检测蛋白及磷酸化蛋白的水平.结果 疾病进展期CML(包括加速期和急变期)患者SHP-1 mRNA的相对表达水平为0.79±0.37,较慢性期CML(CP-CML)的1.18±0.64明显降低(P=0.009),疾病进展期CML患者SHP-1蛋白相对表达水平(0.57±0.02)较CP-CML患者降低(1.02±0.04)(P=0.039).CP-CML患者SHP-1基因启动子的甲基化阳性率(10/42,23.8％)明显低于疾病进展期CML患者(52/52,100.0％) (P＜0.01).过表达SHP-1基因的K562-SHP-1细胞与转染空载体的K562-EGFP细胞相比,增殖受抑,凋亡率增加,并出现G0/G1期的细胞阻滞.过表达SHP-1基因降低K562细胞中BCR-ABL蛋白的水平,但不影响BCR-ABL mRNA的转录;过表达SHP-1基因能降低K562细胞MYC蛋白及磷酸化Akt、MAPK、JAK2、STAT5蛋白的表达水平,而对K5

作者：李英华；王兴哲；杨琳；潘玉夏；尚银涛；罗建民

来源：中华血液学杂志 2014 年 35卷 12期