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目的 比较RNA干扰(RNAi)和伊马替尼(imatinib)杀伤K562细胞的效果.方法 设计有效的bcr-abl干扰shRNA序列,利用基因工程技术插入到干扰载体构建RNAi质粒.测序鉴定正确的RNAi质粒转染K562细胞,48 h后荧光显微镜观察转染效率.RT-PCR技术检测K562细胞中hcr-ahl表达水平.同时,伊马替尼作用K562细胞.利用凋亡分析、MTT增生实验和磷酸化的酪氨酸蛋白含量检测来评估RNAi和伊马替尼作用效果.结果 与伊马替尼一样,RNAi使K562细胞凋亡增强,增生减少,磷酸化的酪氨酸蛋白含量减少.结论 RNAi达到伊马替尼杀伤K562细胞的效果,有望在临床用于治疗慢性髓细胞白血病(CML)患者,尤其是那些对伊弓替尼等化疗药物不敏感的CML患者.

作者:顾香芳;孙雪梅;陈军浩;刘勇;潘金顺

来源:肿瘤研究与临床 2008 年 20卷 11期

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作者:
顾香芳;孙雪梅;陈军浩;刘勇;潘金顺
来源:
肿瘤研究与临床 2008 年 20卷 11期
标签:
白血病,髓样,慢性 K562细胞 RNA干扰 融合蛋白质类,bcr-abl Leukemia,myeloid,chronic K562 cells RNA interference Fusion proteins,bcr-abl
目的 比较RNA干扰(RNAi)和伊马替尼(imatinib)杀伤K562细胞的效果.方法 设计有效的bcr-abl干扰shRNA序列,利用基因工程技术插入到干扰载体构建RNAi质粒.测序鉴定正确的RNAi质粒转染K562细胞,48 h后荧光显微镜观察转染效率.RT-PCR技术检测K562细胞中hcr-ahl表达水平.同时,伊马替尼作用K562细胞.利用凋亡分析、MTT增生实验和磷酸化的酪氨酸蛋白含量检测来评估RNAi和伊马替尼作用效果.结果 与伊马替尼一样,RNAi使K562细胞凋亡增强,增生减少,磷酸化的酪氨酸蛋白含量减少.结论 RNAi达到伊马替尼杀伤K562细胞的效果,有望在临床用于治疗慢性髓细胞白血病(CML)患者,尤其是那些对伊弓替尼等化疗药物不敏感的CML患者.