目的 研究脑源性神经营养因子(BDNF)对多发性骨髓瘤(MM)细胞表达血管内皮生长因子(VEGF)的调控作用,初步探讨BDNF与MM血管新生的关系.方法 设计和构建针对人BDNF基因的siRNA表达载体,用脂质体LipofectamineTM2000介导转染,将空载体质粒pGenesil-1和重组质粒pGenesil-shRNA-BDNF分别转染MM细胞株RPMI8226细胞(分别命名为P0组、P1组).采用RT-PCR法和Western-blot法鉴定干扰后BDNF的表达;MTT法和流式细胞术检测细胞的增殖、凋亡;RT-PCR法和ELISA法检测干扰BDNF对细胞表达VEGF的影响.结果 ①成功构建了针对BDNF的siRNA真核表达载体.与未转染组(Pn组)及P0组相比,P1组BDNF mRNA水平及蛋白水平显著下调(P值均＜0.05);②P1组细胞的增殖活性(0.42±0.06)显著低于Pn组(0.56±0.06)和P0组(0.50±0.04)(P值均＜0.05);③P1组细胞的早期凋亡率[(53.84±9.95)％]明显高于Pn组[(5.23±2.46)％]和P0组[(9.10±3.46)％] (P值均＜0.01);④P1组细胞VEGF121、VEGF145和VEGF165mRNA表达水平分别为Pn组的(0.62±0.07)、(0.47±0.09)和(0.57±0.02)倍(P值均＜0.05).⑤P1组细胞VEGF的分泌水平分别为Pn组的(0.36±0.05)倍和P0组的(0.44±0.06)倍(P值均＜0.05).结论 BDNF基因沉默可促进RPMI8226细胞凋亡并抑制其增殖,下调RPMI8226细

作者：黄靖；褚章波；陈蕾；王雅丹；张璐；胡豫；孙春艳

来源：中华血液学杂志 2015 年 36卷 5期