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目的观察体外孵育的牛血清白蛋白(BSA)非酶促糖基化终末产物(AGEs)对牛视网膜微血管内皮细胞(BREC)和周细胞(BRP)存活和形态的影响.方法取终浓度为50 mg/ml的牛血清白蛋白(BSA)、500 mmol/L D-葡萄糖,于37℃孵箱内避光孵育12周,制备外源性AGEs-BSA,经SephacrylS 300层析纯化,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)蛋白电泳鉴定AGEs-BSA和coomassie蛋白质定量法测定蛋白浓度.分设不同浓度梯度的AGEs-BSA实验组和BSA对照组,以及空白对照组,分别观察体外孵育的AGEs-BSA对体外培养的BREC和BRP的毒性作用.相差倒置显微镜观察500μg/ml AGEs-BSA和BSA作用48 h对BREC和BRP形态的影响.结果随着AGEs-BSA剂量的增加,细胞被抑制呈上升趋势.500μg/ml AGEs-BSA抑制BREC为空白对照组的(72.8±15.9)

作者:夏欣;许迅;顾青

来源:中华眼底病杂志 2006 年 22卷 1期

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作者:
夏欣;许迅;顾青
来源:
中华眼底病杂志 2006 年 22卷 1期
标签:
糖基化终末产物,高级 细胞培养 周细胞 血管内膜
目的观察体外孵育的牛血清白蛋白(BSA)非酶促糖基化终末产物(AGEs)对牛视网膜微血管内皮细胞(BREC)和周细胞(BRP)存活和形态的影响.方法取终浓度为50 mg/ml的牛血清白蛋白(BSA)、500 mmol/L D-葡萄糖,于37℃孵箱内避光孵育12周,制备外源性AGEs-BSA,经SephacrylS 300层析纯化,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)蛋白电泳鉴定AGEs-BSA和coomassie蛋白质定量法测定蛋白浓度.分设不同浓度梯度的AGEs-BSA实验组和BSA对照组,以及空白对照组,分别观察体外孵育的AGEs-BSA对体外培养的BREC和BRP的毒性作用.相差倒置显微镜观察500μg/ml AGEs-BSA和BSA作用48 h对BREC和BRP形态的影响.结果随着AGEs-BSA剂量的增加,细胞被抑制呈上升趋势.500μg/ml AGEs-BSA抑制BREC为空白对照组的(72.8±15.9)