目的 观察丁基苯酞(NBP)对H2O2诱导下RPE细胞凋亡的保护作用.方法 以人ARPE-19细胞系为实验细胞,并将其分为对照组、模型组及NBP组.对照组单纯采用完全培养基培养细胞.模型组采用200μmol/L的H2O2刺激细胞2 h,换液后给予完全培养基培养细胞.NBP组采用200μmol/L的H2O2及1μmol/L的NBP共同培养细胞2 h,换液后给予完全培养基联合1μmol/L的NBP继续培养细胞.采用MTT法检测细胞受到氧化应激刺激后的细胞活力;HE染色对RPE细胞形态进行观察;Hoechst33258染色观察RPE细胞凋亡形态;线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)观察细胞膜电位改变及细胞早期凋亡变化;2,7-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)染色观察细胞内ROS生成堆积情况;细胞免疫荧光和Western blot分析NBP对血红素氧合酶1(HO-1)表达的影响.结果 MTT法检测结果显示,细胞培养24、48 h,对照组(t=17.710、13.760,P<0.0001、<0.0001)、NBP组(t=4.857、9.225,P=0.0007、P<0.0001)细胞生存力均较模型组更强,差异均有统计学意义.HE染色及Hoechst33258染色观察发现,与对照组比较,模型组细胞数量明显变少,细胞形态不完整;与模型组比较,NBP组细胞数量明显增多,细胞形态更好.JC-1法检测结果显示,模型组凋亡细胞数较对照组明显增多,NBP组凋亡细胞数较模型组明显减少.DCFH-DA
作者:邢小丽;黄亮瑜;张哲;黄欣远;王琼;李筱荣;东莉洁
来源:中华眼底病杂志 2019 年 35卷 5期