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目的 研究胸腺基质淋巴细胞生成素受体(TSLPR)/信号转录活化子5(STAT5)在人角膜基质细胞(THSF)抗烟曲霉菌感染免疫中的作用.方法 实验研究.免疫荧光检测正常培养条件下角膜基质细胞TSLPR的表达.将人重组TSLP蛋白(hTSLP)添加至培养基中,于5、15、30、60 min收取细胞,免疫印迹法检测磷酸化STAT5(p-STAT5)和STAT5的蛋白表达.烟曲霉菌刺激细胞后,于1、3、6、12、24、48 h收取细胞,RT-PCR检测TSLPR和IL-7Rα的mRNA表达;于刺激后12、24、48 h收取细胞,免疫印迹法检测TSLPR、p-STAT5和STAT5的蛋白表达.中和性抗体封闭TSLPR受体后,烟曲霉菌刺激细胞24h,免疫印迹法检测p-STAT5和STAT5的蛋白表达.组间均数的比较采用单因素方差分析,均数间的多重比较采用LSD-t检验;组间均数的两两比较采用独立样本个t检验.结果 免疫荧光显示,THSF可见绿色荧光,正常THSF表达TSLPR;人重组TSLP蛋白刺激细胞后,免疫印迹法显示p-STAT5增多,至30 min时达峰(烟曲霉菌组:8.87±0.75;对照组:1.00±0.14),差异有统计学意义(P<0.0l).烟曲霉菌刺激细胞后3、6、12、24h TSLPR mRNA (0.000 50±0.000 07、0.001 20±0.000 11、0.002 30±0.000 25、0.001 70±0.000 17)较对照组(0.000 20±0.000 03、0.000 20±0.000 05、0.000 20±0.000 03、0.0

作者:任晓晓;吴欣怡

来源:中华眼科杂志 2016 年 52卷 3期

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任晓晓;吴欣怡
来源:
中华眼科杂志 2016 年 52卷 3期
标签:
曲霉菌病 烟曲霉菌 角膜基质细胞 受体,细胞因子 STAT5转录因子 体外研究 Aspergillosis Aspergillus fumigatus Corneal keratocytes Receptors,cytokine STAT5 transcription factor In vitro
目的 研究胸腺基质淋巴细胞生成素受体(TSLPR)/信号转录活化子5(STAT5)在人角膜基质细胞(THSF)抗烟曲霉菌感染免疫中的作用.方法 实验研究.免疫荧光检测正常培养条件下角膜基质细胞TSLPR的表达.将人重组TSLP蛋白(hTSLP)添加至培养基中,于5、15、30、60 min收取细胞,免疫印迹法检测磷酸化STAT5(p-STAT5)和STAT5的蛋白表达.烟曲霉菌刺激细胞后,于1、3、6、12、24、48 h收取细胞,RT-PCR检测TSLPR和IL-7Rα的mRNA表达;于刺激后12、24、48 h收取细胞,免疫印迹法检测TSLPR、p-STAT5和STAT5的蛋白表达.中和性抗体封闭TSLPR受体后,烟曲霉菌刺激细胞24h,免疫印迹法检测p-STAT5和STAT5的蛋白表达.组间均数的比较采用单因素方差分析,均数间的多重比较采用LSD-t检验;组间均数的两两比较采用独立样本个t检验.结果 免疫荧光显示,THSF可见绿色荧光,正常THSF表达TSLPR;人重组TSLP蛋白刺激细胞后,免疫印迹法显示p-STAT5增多,至30 min时达峰(烟曲霉菌组:8.87±0.75;对照组:1.00±0.14),差异有统计学意义(P<0.0l).烟曲霉菌刺激细胞后3、6、12、24h TSLPR mRNA (0.000 50±0.000 07、0.001 20±0.000 11、0.002 30±0.000 25、0.001 70±0.000 17)较对照组(0.000 20±0.000 03、0.000 20±0.000 05、0.000 20±0.000 03、0.0